"NL20 Cell:人支氣管上皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:支氣管上皮細胞;SV40轉化;女性 A204細胞系相關產(chǎn)品:HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞 HUVEC細胞系相關產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞 TFH細胞系相關產(chǎn)品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 C-26細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 NL20 Cell:人支氣管上皮細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HuT78細胞系相關產(chǎn)品:P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞 LS 513細胞系相關產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞 HCC-1588細胞系相關產(chǎn)品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞 EFO27細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞 HEC251細胞系相關產(chǎn)品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞 細胞生長特性:貼壁 NL20 Cell:人支氣管上皮細胞系 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 SNB.19細胞系相關產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞 AR4-2J細胞系相關產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞 UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞 RKO-E6細胞系相關產(chǎn)品:RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞 LS174T細胞系相關產(chǎn)品:Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞 NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞 DC2.4細胞系相關產(chǎn)品:Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞 NL20 Cell:人支氣管上皮細胞系 NBLS細胞系相關產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞 MOLT-4細胞系相關產(chǎn)品:HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞 SNU-1細胞系相關產(chǎn)品:MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞 NS1-1 Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞 COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞 OCI/AML4細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞 YD15細胞系相關產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 NT2D1細胞系相關產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞 Det. 562細胞系相關產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞 Det. 562細胞系相關產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞 Pro-5WgaRI3C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞 NCI-H660細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞 SNU-739細胞系相關產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞 COLO 320 DM細胞系相關產(chǎn)品:HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞 MDA-MB 453細胞系相關產(chǎn)品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞 Panc 2.03細胞系相關產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞 HEL-92_1_7細胞系相關產(chǎn)品:SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞 184A1細胞系相關產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞 X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞 Panc02細胞系相關產(chǎn)品:P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞 NCI/ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞 SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞 ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品:KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞 SK-MEL3細胞系相關產(chǎn)品:D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞 Caki-1細胞系相關產(chǎn)品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞 LS 513細胞系相關產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞 PC3M-IE8細胞系相關產(chǎn)品:NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞 HCC-1438細胞系相關產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞 H2110細胞系相關產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞 MDAMB435細胞系相關產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞 CALU 1細胞系相關產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞 NCI-322細胞系相關產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 786-O RCC細胞系相關產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞 L-929細胞系相關產(chǎn)品:SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞 COLO-320HSR細胞系相關產(chǎn)品:UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞 Ku812細胞系相關產(chǎn)品:VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞 TPC-1細胞系相關產(chǎn)品:OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞 Th17細胞系相關產(chǎn)品:MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞 NK-92MI細胞系相關產(chǎn)品:SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞 McA-RH 8994細胞系相關產(chǎn)品:A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞 MES-SA細胞系相關產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 GA-10(Clone 4)細胞系相關產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞 Hs940T細胞系相關產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞 NL20 Cell:人支氣管上皮細胞系 Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞 L 929細胞系相關產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞 EBNA-293細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞 GM04671細胞系相關產(chǎn)品:HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞 NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞 CEMC1細胞系相關產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞 PC14細胞系相關產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞 CAL 148細胞系相關產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞 MDA157細胞系相關產(chǎn)品:Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞 PLCPRF5細胞系相關產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞 H727細胞系相關產(chǎn)品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞 SK N SH細胞系相關產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、CA922細胞、CPA 47細胞 "
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