"SUM190PT Cell:人乳腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:乳腺癌;女性 H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞 IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞 Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞 H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 SUM190PT Cell:人乳腺癌細胞系 細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞 H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞 ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞 Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞 NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞 細胞生長特性:貼壁 SUM190PT Cell:人乳腺癌細胞系 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞 LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞 3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞 OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞 MC 3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞 PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞 C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞 SUM190PT Cell:人乳腺癌細胞系 HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞 HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞 PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞 NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞 hMSC-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞 Mia PACA 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞 NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞 FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞 HCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞 XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞 IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞 HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞 C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞 MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞 B95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細胞、HT29細胞、Kit-225-K6細胞 IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞 H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞 T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞 DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞 Henrietta Lacks cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞 SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞 QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞 IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞 MRCV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞 LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞 NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞 BIU-87/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞 OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞 NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞 T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞 Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞 MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞 OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞 GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞 NCI-H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞 CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞 U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞 KP 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞 NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞 NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞 SUM190PT Cell:人乳腺癌細胞系 B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞 SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞 MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞 HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞 C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞 PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞 HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞 OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞 rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞 OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞 Melanoma 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細胞、NSC-34細胞、OVCAR5細胞 HCPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-67細胞、U-343-MG細胞、Kit-225細胞 "
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