"Kelly Cell:人神經(jīng)母細胞瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:神經(jīng)母細胞瘤;女性 FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞 CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞 Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 Kelly Cell:人神經(jīng)母細胞瘤細胞系 細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴(yán),必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞 M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞 U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞 Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞 MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞 細胞生長特性:貼壁 Kelly Cell:人神經(jīng)母細胞瘤細胞系 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 Panc_02_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞 QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞 EC-9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞 Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞 M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞 Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞 VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞 Kelly Cell:人神經(jīng)母細胞瘤細胞系 ME-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞 GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞 Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞 ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞 CHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞 HCC0038細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞 SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞 GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞 GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞 Hs675細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞 RPE-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞 BIU87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞 Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞 HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞 Ramos G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細胞、T-ALL-1細胞、MDA-MB-175VII細胞 MESSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞 BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞 SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞 H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞 SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞 PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞 KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞 HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞 OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞 HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞 58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞 DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞 BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞 Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞 Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞 HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞 SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞 IA-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞 RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞 PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞 CAL 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞 HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞 NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞 Kelly Cell:人神經(jīng)母細胞瘤細胞系 Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞 HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞 LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞 SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞 SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞 TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細胞、J111細胞、M14細胞 U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞 Hs-578-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞 MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞 H9c2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞 Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、Mel-MeWo細胞、NCI-H2198細胞 "
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