"SK-GT-2 Cell:人胃癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:胃底癌;男性 8305C_1細胞系相關產品:NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞 Tu-177細胞系相關產品:MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞 BAC1.2F5細胞系相關產品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞 P19細胞系相關產品:KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 SK-GT-2 Cell:人胃癌細胞系 細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 OVCA420細胞系相關產品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞 MBMEC細胞系相關產品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞 MN-9D細胞系相關產品:Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 UMC11細胞系相關產品:U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞 CMT167細胞系相關產品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞 細胞生長特性:貼壁 SK-GT-2 Cell:人胃癌細胞系 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 C3H10T1/2 clone8細胞系相關產品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞 RetroPack PT67細胞系相關產品:MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞 KNS-42細胞系相關產品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞 MV4II細胞系相關產品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞 MEG01細胞系相關產品:OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞 L-M(TK-)細胞系相關產品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞 Oregon J-111細胞系相關產品:RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞 SK-GT-2 Cell:人胃癌細胞系 Panc8.13細胞系相關產品:GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞 HTR8/SVneo細胞系相關產品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞 746T細胞系相關產品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞 L 540細胞系相關產品:JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞 H322T細胞系相關產品:H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞 HEK-2細胞系相關產品:HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞 Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞 H-1341細胞系相關產品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞 JIMT細胞系相關產品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞 JIMT細胞系相關產品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞 Hs 578T細胞系相關產品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞 Vx-2細胞系相關產品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 SNU1040細胞系相關產品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞 Hep 3B2.1-7細胞系相關產品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞 MBdSMC細胞系相關產品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞 HO-8910細胞系相關產品:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞 HEK293-EBNA細胞系相關產品:Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞 SF539細胞系相關產品:K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞 RN-c細胞系相關產品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞 NALM-6-M1細胞系相關產品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞 H1092細胞系相關產品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞 H1092細胞系相關產品:MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞 OCI-LY-8細胞系相關產品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞 RM-1細胞系相關產品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞 L 428細胞系相關產品:SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞 KYSE450細胞系相關產品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞 A-172 MG細胞系相關產品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞 RIN m5F細胞系相關產品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞 NCIH2172細胞系相關產品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞 BALB 3T3 clone A31細胞系相關產品:MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞 FOX-NY細胞系相關產品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞 NL20SV細胞系相關產品:MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞 ECC 10細胞系相關產品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞 P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關產品:SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞 NTera 2/cl.D1細胞系相關產品:H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞 RBL-1細胞系相關產品:RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞 SNU-886細胞系相關產品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 P31FUJ細胞系相關產品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞 U373 MG細胞系相關產品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞 TGW-I-nu細胞系相關產品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞 NCI-H1155細胞系相關產品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞 Swiss 3T3細胞系相關產品:JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞 EAhy926細胞系相關產品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞 SK-GT-2 Cell:人胃癌細胞系 H2591細胞系相關產品:Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞 DHL-2細胞系相關產品:Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞 HCET細胞系相關產品:NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞 H1404細胞系相關產品:He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞 OS-RC-2細胞系相關產品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞 H-2081細胞系相關產品:PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞 H-676B細胞系相關產品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞 OAW 42細胞系相關產品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞 GM15452細胞系相關產品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞 NCI-H2106細胞系相關產品:Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞 ELD-1細胞系相關產品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞 MLE-12細胞系相關產品:MDA361細胞、RMC-1細胞、L-929細胞 "
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