"PANC-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:這株人胰腺癌細(xì)胞株源自于胰腺癌導(dǎo)管細(xì)胞,其倍增時(shí)間為52小時(shí)。染色體研究表明,該細(xì)胞染色體眾數(shù)為63,包括3個(gè)獨(dú)特標(biāo)記的染色體和1個(gè)小環(huán)狀染色體。該細(xì)胞的生長(zhǎng)可被1unit/ml的左旋天冬酰胺酶抑制;能在軟瓊脂上生長(zhǎng);能在裸鼠上成瘤。 FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞 OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞 BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞 EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 PANC-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說(shuō)培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長(zhǎng)的空間密度問(wèn)題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。2.對(duì)于有些人總是會(huì)遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無(wú)血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入培養(yǎng)基的量的問(wèn)題。這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會(huì)長(zhǎng)得比較好。(可能也是競(jìng)爭(zhēng)很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對(duì)于生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞,易生長(zhǎng)的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會(huì)更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問(wèn)題。個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在玻璃瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的狀態(tài)會(huì)比一次性相對(duì)好一些。而對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長(zhǎng)旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶?jī)?nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔A扛菀踪N壁。生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在這種相對(duì)“更安逸”的環(huán)境里反而長(zhǎng)得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會(huì)好,對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會(huì)更好。同樣,對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長(zhǎng)速度慢的時(shí)候,會(huì)好一點(diǎn),比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候,或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長(zhǎng)旺盛的時(shí)候,玻璃瓶則相對(duì)會(huì)好一點(diǎn)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周2-3次。 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞 SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞 TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞 JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞 beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) PANC-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形 NCI-H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞 A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞 WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞 Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞 HCT-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞 NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞 CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞 PANC-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系 NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞 FHCRC subclone 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、ARO81細(xì)胞 MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞 KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞 TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞 THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞 CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞 T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞 CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞 CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞 PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞 COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞 NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞 Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞 EL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞 NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞 NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞 Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞 NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞 CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞 P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞 LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞 293T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-64細(xì)胞、HL-60 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MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞 FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞 H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞 SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞 HEK 293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞 SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞 QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞 U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞 PANC-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系 HCC-1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞 P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞 BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞 CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞 HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞 HONE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞 SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞 SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞 HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞 EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞 COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞 GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞 "
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