"PL45 Cell:人胰腺導管腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 Pa17C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細胞、2B4-L細胞、HT 1197.T細胞 Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞 C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 PL45 Cell:人胰腺導管腺癌細胞系 細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞 SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞 Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞 NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞 LA-N-6(OAN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞 細胞生長特性:貼壁生長 PL45 Cell:人胰腺導管腺癌細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:上皮樣 SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞 Hepa 1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞 H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞 RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞 mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞 NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞 RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 PL45 Cell:人胰腺導管腺癌細胞系 BC-025細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞 PaTu8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞 Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞 KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞 GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞 NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞 3T3 J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細胞、RPMI 8402細胞、G-401細胞 UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞 GA-10-Clone-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞 GA-10-Clone-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞 VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞 PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞 P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞 CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞 TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞 COLO 699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞 HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞 Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞 MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞 NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞 TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞 TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞 Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞 HPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞 NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞 DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞 C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞 NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞 Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞 H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞 BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞 Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞 NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞 RCC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞 DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞 SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞 Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞 JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞 H-378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞 NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞 Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞 RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 PL45 Cell:人胰腺導管腺癌細胞系 Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞 CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞 Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞 NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞 LIM1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞 D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞 A-72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細胞、aTC1 Clone 6細胞、NU-GC-4細胞 OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞 WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細胞、LA-N-6細胞、COLO-HSR細胞 "
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