"MCF-7 Cell:人乳腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:MCF-7細胞保留了多個分化了的乳腺上皮的特性,包括:能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復(fù)合物(domes)。該細胞含有Tx-4癌基因。腫瘤壞死因子α(TNFalpha)可以抑制MCF-7細胞的生長。抗雌激素處理細胞能調(diào)變IGFBP'S的分泌。 DOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞 NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞 H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞 COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MCF-7 Cell:人乳腺癌細胞系 細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代,3-4天長滿 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞 Uhth-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS (TE85, Clone F5)細胞、P30-OHK細胞、OSKM-1細胞 NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞 HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞 NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞 細胞生長特性:貼壁生長 MCF-7 Cell:人乳腺癌細胞系 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 Hca-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞 Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞 H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞 EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞 SW780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞 BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞 THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 MCF-7 Cell:人乳腺癌細胞系 OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞 L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞 TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞 SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞 H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞 MFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞 B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞 D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞 UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞 UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞 SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞 MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞 COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞 Tca-8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞 Renal Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞 Hs888T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞 U251n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞 H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞 JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞 HUT 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞 MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞 SLMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞 SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞 Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞 CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞 38C-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞 no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞 KNS81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞 ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞 SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞 MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞 P3X63 AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞 MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞 Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞 COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞 SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞 LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞 CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞 NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 SNUC2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞 HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞 WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞 NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞 MCF-7 Cell:人乳腺癌細胞系 Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞 ES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞 RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞 Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞 A498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞 IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞 TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞 NALM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞 U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞 RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞 OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細胞、MC9細胞、MDAMB134VI細胞 "
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