"MDA-MB-231 Cell:人乳腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:MDA-MB-231來自患有轉移乳腺腺癌的51歲女病人的胸水。在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III級)。 HEK293A細胞系相關產品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞 SKMEL24細胞系相關產品:32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞 SNB.19細胞系相關產品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞 H-446細胞系相關產品:U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MDA-MB-231 Cell:人乳腺癌細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關于培養(yǎng)瓶內加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態(tài)也比內好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內可長滿 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的完全培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯系實驗室。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 H-1693細胞系相關產品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞 SN12PM6細胞系相關產品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞 Malme-3 M細胞系相關產品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞 MG-63細胞系相關產品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞 RAMOS2G64C10細胞系相關產品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞 細胞生長特性:貼壁生長 MDA-MB-231 Cell:人乳腺癌細胞系 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 細胞形態(tài)特性:上皮樣 rRMECs細胞系相關產品:NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞 Vero E-6細胞系相關產品:OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞 HCCC-9810細胞系相關產品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞 TW 01細胞系相關產品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞 COLO 206細胞系相關產品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞 IPEC-J2細胞系相關產品:NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞 WERI細胞系相關產品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞 MDA-MB-231 Cell:人乳腺癌細胞系 SKGIIIA細胞系相關產品:Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞 RS4-11細胞系相關產品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞 HCCLM6細胞系相關產品:LM3細胞、639 V細胞、Capan 2細胞 KMS18細胞系相關產品:NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞 P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 H1869細胞系相關產品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 Pt K2 (NBL-5)細胞系相關產品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞 H1563細胞系相關產品:GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞 G-402細胞系相關產品:FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞 G-402細胞系相關產品:FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞 OCI-Ly03細胞系相關產品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞 MDA-468細胞系相關產品:HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞 HS852.T細胞系相關產品:HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞 P3X63 Ag8細胞系相關產品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞 MDA468細胞系相關產品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞 SK_HEP1細胞系相關產品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 SK-ChA-1細胞系相關產品:CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞 Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產品:MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞 X63細胞系相關產品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞 VMCUB-1細胞系相關產品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞 MHCC97細胞系相關產品:SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞 ML-2細胞系相關產品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞 MOLT-3細胞系相關產品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞 HT-1197細胞系相關產品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞 Earle's L cells細胞系相關產品:MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞 COR-L88細胞系相關產品:FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞 Hep 3B細胞系相關產品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞 H-498細胞系相關產品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞 95-D細胞系相關產品:Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞 PANC 813細胞系相關產品:HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞 ABE8.1/2細胞系相關產品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞 Panc2.03細胞系相關產品:AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞 SCC9細胞系相關產品:NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞 SU-DHL-2細胞系相關產品:KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞 SK-RC-39細胞系相關產品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞 H1435細胞系相關產品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞 TE-1細胞系相關產品:OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞 LIPF155C細胞系相關產品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞 HPAF-II細胞系相關產品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 NCI660細胞系相關產品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞 alpha TC1.6細胞系相關產品:HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞 L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品:ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞 CNE-1細胞系相關產品:HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞 MDA-MB-231 Cell:人乳腺癌細胞系 GM00637I細胞系相關產品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞 BCP1細胞系相關產品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞 PM6細胞系相關產品:H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞 TO175T細胞系相關產品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞 NCIH2107細胞系相關產品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關產品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 Hk-2細胞系相關產品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞 Hs-578Bst細胞系相關產品:MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞 McA-RH7777細胞系相關產品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞 BE2C細胞系相關產品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞 RC13細胞系相關產品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞 HTR-8細胞系相關產品:NCI-H2330細胞、DHL10細胞、CC-LP-I細胞 "
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