"MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系由CailleauR在1976年從一名48歲的患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的白人女性的心包滲出液中分離建立的。該細(xì)胞表達(dá)FGF的受體。 EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞 U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞 Colon 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞 A549ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1435細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞、RGB細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 如何把細(xì)胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長(zhǎng)的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。2.對(duì)于有些人總是會(huì)遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會(huì)長(zhǎng)得比較好。(可能也是競(jìng)爭(zhēng)很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對(duì)于生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞,易生長(zhǎng)的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會(huì)更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在玻璃瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的狀態(tài)會(huì)比一次性相對(duì)好一些。而對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長(zhǎng)旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶?jī)?nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因?yàn)楸炔A扛菀踪N壁。生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在這種相對(duì)“更安逸”的環(huán)境里反而長(zhǎng)得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài),比玻璃瓶會(huì)好,對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞,玻璃瓶則會(huì)更好。同樣,對(duì)于同一種細(xì)胞,在其生長(zhǎng)速度慢的時(shí)候,會(huì)好一點(diǎn),比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候,或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長(zhǎng)旺盛的時(shí)候,玻璃瓶則相對(duì)會(huì)好一點(diǎn)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞 SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞 SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞 TALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞 MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形 P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞 HM1900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細(xì)胞、RFL6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞 Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞 J82 COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細(xì)胞、Namalva細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞 SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞 MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞 TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞 SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞 HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞 PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞 SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞 CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞 SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞 SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞 MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞 MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞 MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞 McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞 SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞 526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞 MXI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞 DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞 EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞 BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞 SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞 Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞 A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞 Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞 MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞 HT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE353.SK細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞、WM-239細(xì)胞 NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞 MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞 Sp2/mIL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞 K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞 PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞 LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞 KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞 TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞 Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞 RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞 BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞 Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞 RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞 RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞 MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞 Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 SK-N-BE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞 D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞 H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞、293F細(xì)胞 MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞 Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞 870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞 RPPVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H209細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞、UACC893細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞 U-2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞 H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞 P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞 "
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