"KB Cell:口腔表皮樣癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:最初認為這個細胞源自口腔表皮癌,但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn),起源細胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 有報告稱KB細胞含有人乳頭狀瘤病毒18 (HPV-18)序列。 SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞 AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞 HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 KB Cell:口腔表皮樣癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞 SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞 HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞 Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞 ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞 細胞生長特性:懸浮生長 KB Cell:口腔表皮樣癌細胞系 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞 P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞 NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞 SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞 B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞 Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞 HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞 KB Cell:口腔表皮樣癌細胞系 NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞 Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞 M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞 Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞 LC-1 sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞 HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞 SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞 L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞 NCIH889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞 RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞 NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞 QBI-HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞 PL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA1細胞、RINm-5F細胞、B 95.8細胞 Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞 DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞 PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞 KP-N-RT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 JVM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞 AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞 MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞 BEL-7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞 Panc10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞 H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞 RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞 KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞 253J-BV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞 NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞 KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞 KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞 ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞 A72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞 V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞 HCC9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞 SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞 Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞 Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞 SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞 COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞 KB Cell:口腔表皮樣癌細胞系 HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞 NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞 KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞 NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞 Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞 SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞 HDQP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞 Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞 HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞 HS 683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞 B 95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-4細胞、SAOS 2細胞、Panc 02細胞 "
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