"ACC-3 Cell:人涎腺腺樣囊性癌細胞系

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞背景資料：Acc-３細胞源自一位４９歲男性的腺樣囊性癌。能表達角蛋白。

SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞

RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞

Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞

PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

ACC-3 Cell:人涎腺腺樣囊性癌細胞系

細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。

培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞

UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞

MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞

Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞

149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞

細胞生長特性：貼壁生長

ACC-3 Cell:人涎腺腺樣囊性癌細胞系

細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。

細胞形態(tài)特性：上皮樣

293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞

H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞

B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞

PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞

OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞

RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞

TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞

ACC-3 Cell:人涎腺腺樣囊性癌細胞系

Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞

MHCC 97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞

HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞

CNE1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞

AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞

NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞

SW 620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞

RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞

HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞

HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞

ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞

FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞

Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞

AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞

293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞

NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞

NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞

NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞

CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞

58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞

K562/ADP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞

MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞

P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞

CT26.CL25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞

A2780/Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞

MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞

H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞

W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞

GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞

H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞

NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞

Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞

HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞

Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞

ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞

MOLT.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞

CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞

hSCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞

HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞

TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞

MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞

CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞

PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞

ACC-3 Cell:人涎腺腺樣囊性癌細胞系

He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞

THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞

RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Colo741細胞、D10G41細胞

KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞

SCC 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞

Microbiological Associates-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞

MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞

UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞

LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞

TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞

Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞

GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細胞、REC1細胞、H295細胞

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