"NCI-H226 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:1980年分離建立。 Calu6細胞系相關產品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞 NRK clone 52E細胞系相關產品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞 Hepa-RG細胞系相關產品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞 VSMC細胞系相關產品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 NCI-H226 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 P-36細胞系相關產品:HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞 HFLS-RA細胞系相關產品:Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞 CHL-1細胞系相關產品:NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞 MPC-83細胞系相關產品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞 TGW-nu細胞系相關產品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞 細胞生長特性:貼壁生長 NCI-H226 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 COLO-680N細胞系相關產品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞 CTLL2細胞系相關產品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 CORL105細胞系相關產品:HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞 CAOV3細胞系相關產品:CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞 HCC-1569細胞系相關產品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞 RKO-E6細胞系相關產品:RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞 HUT 28細胞系相關產品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞 NCI-H226 Cell:人肺鱗癌細胞系 EL-4細胞系相關產品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞 Madison細胞系相關產品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞 NIH:OVCAR-10細胞系相關產品:RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞 OEC33細胞系相關產品:ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞 CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞 HIEC6細胞系相關產品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞 NCIH596細胞系相關產品:Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞 DoHH2細胞系相關產品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞 NCI-H2122細胞系相關產品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞 NCI-H2122細胞系相關產品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞 Me-Wo細胞系相關產品:CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞 QGY 7701細胞系相關產品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞 KALS1細胞系相關產品:NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞 IHHA-1細胞系相關產品:G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞 NCIH747細胞系相關產品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞 HT 1080細胞系相關產品:KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞 A2008細胞系相關產品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞 NCI-460細胞系相關產品:CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞 HSAS1細胞系相關產品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞 Hs-695-T細胞系相關產品:H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞 SKCol1細胞系相關產品:AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞 SK-RC-39細胞系相關產品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞 MV4II細胞系相關產品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞 Hs888Lu細胞系相關產品:COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞 Panc-08.13細胞系相關產品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞 RMG-1細胞系相關產品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞 766T細胞系相關產品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞 NCI-H1563細胞系相關產品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞 BGC823細胞系相關產品:KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞 Jijoye細胞系相關產品:D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞 TE 671細胞系相關產品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞 SNU601細胞系相關產品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞 NTERA-2/D1細胞系相關產品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞 HECCL-1細胞系相關產品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞 Hs 839.T細胞系相關產品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞 COLO320-DM細胞系相關產品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞 CTLL-2細胞系相關產品:M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞 HHFK細胞系相關產品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞 MADB-106細胞系相關產品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞 NCI-H716細胞系相關產品:GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞 SK-MEL-2細胞系相關產品:SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞 H1385細胞系相關產品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞 NCIH548細胞系相關產品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞 NCI-H226 Cell:人肺鱗癌細胞系 WSU-DLCL-2細胞系相關產品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞 NALM-6細胞系相關產品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞 AX-Mel細胞系相關產品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞 HEK-EBNA細胞系相關產品:SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞 Ramos (RA)細胞系相關產品:BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞 Wistar Institute-38細胞系相關產品:PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞 Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞 HDF-a細胞系相關產品:MDA-330細胞、HCC-38細胞、MILE SVEN 1細胞 A-172細胞系相關產品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞 T-ALL 1細胞系相關產品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞 Japanese Tissue Culture-28細胞系相關產品:HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞 RL-95-2細胞系相關產品:SK-ES-1細胞、Hs 606.T細胞、UMNSAH-DF 1細胞 "
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