"SK-MES-1 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:源于一位65歲患有肺鱗狀細胞癌的白人男性,自轉(zhuǎn)移性胸腔積液分離而來。 SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞 AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞 NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞 NCIH1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 SK-MES-1 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞 H-1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞 H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞 SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞 細胞生長特性:貼壁生長 SK-MES-1 Cell:人肺鱗癌細胞系 細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞 UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞 NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞 REC 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞 CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞 NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞 TOV112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞 SK-MES-1 Cell:人肺鱗癌細胞系 REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞 MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞 TOV112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 SUPB-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞 Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞 Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞 HCC941122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞 NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞 OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞 PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞 NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞 Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞 C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞 Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞 U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞 SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞 Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞 OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞 C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞 Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞 HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞 Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞 SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞 UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞 T-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞 CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞 NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞 SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞 HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞 IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞 MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞 P3-X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 2185細胞、Reuber H35細胞、H460細胞 P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞 SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞 CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞 SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞 H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞 OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞 HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞 CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞 RBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV-1細胞、HEK 293 c18細胞、NS1-Ag4/1細胞 Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞 SK-MES-1 Cell:人肺鱗癌細胞系 CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞 REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞 FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞 beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞 NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞 L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞 PLC8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞 COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞 RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞 KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞 COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞 KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、OPM2細胞、C33A細胞 "
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