化學(xué)名

2-[(2S)-1-[3-ethyl-7-[(1-oxidopyridin-1-ium-3-yl)methylamino]pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-5-yl]piperidin-2-yl]ethanol

簡(jiǎn)稱

Dinaciclib

別名

MK-7965, SCH727965, SCH 727965, SCH-727965

中文名

N/A

化學(xué)式

C₂₁H₂₈N₆O₂

分子量

396.49

CAS號(hào)

779353-01-4

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO26mg/ml warming; Ethanol8mg/ml warming

溶液配制

5mg加入1.26ml DMSO，或者每3.96mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC6628-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

Dinaciclib (SCH727965)是一種新型有效的CDK抑制劑，作用于CDK2、CDK5、CDK1和CDK9，無(wú)細(xì)胞試驗(yàn)中IC50分別為1nM、1nM、3nM和4nM。它也會(huì)阻斷胸甘(dThd) DNA整合。Phase 3。

信號(hào)通路

Cell Cycle

靶點(diǎn)

CDK2

CDK5

CDK1

CDK9

－

IC50

1nM

1nM

3nM

4nM

－

體外研究

Dinaciclib抑制CDK1和CDK9效果差不多，但是抑制CDK2和CDK5效果則分別強(qiáng)12和14倍。Dinaciclib作用于A2780細(xì)胞，有效抑制的DNA復(fù)制，抑制胸甘(dThd)DNA攝入，IC50為4nM。Dinaciclib濃度大于6.25nM時(shí)，強(qiáng)抑制Rb在Ser 807/811位點(diǎn)磷酸化。Rb磷酸化的完全抑制與凋亡發(fā)生相關(guān)，通過(guò)用濃度大于6.25nM的Dinaciclib處理的細(xì)胞中p85 PARP裂解產(chǎn)物的出現(xiàn)來(lái)表示。Dinaciclib有效作用于廣譜人腫瘤細(xì)胞系。在羥基脲處理期間加入Dinaciclib，也抑制γ-H2AX累積，這種作用存在劑量依賴性。Dinaciclib抑制惡性黑色素瘤細(xì)胞增殖，使惡性黑色素瘤細(xì)胞發(fā)生大規(guī)模凋亡。Dinaciclib誘導(dǎo)一些骨肉瘤細(xì)胞系凋亡，包括抗Doxorubicin和Dasatinib的細(xì)胞。Dinaciclib降低RNAP II在 serine 2位點(diǎn)磷酸化，也降低CDK抑制劑p27Kip1在threonine 187位點(diǎn)磷酸化。加入12nM到40nM Dinaciclib處理4小時(shí)或16小時(shí)，最易使磷酸化作用降低。Dinaciclib也降低Rb在serine 807/811位點(diǎn)磷酸化。Dinaciclib誘導(dǎo)mock-和p53-耗盡的U2OS細(xì)胞凋亡，凋亡程度相似。

體內(nèi)研究

Dinaciclib每天按8、16、32和48mg/kg劑量腹腔注射處理，持續(xù)10天，導(dǎo)致腫瘤受抑制分別為70%、70%、89%和96%。Dinaciclib MED(最低有效劑量)約為小于8mg/kg。Dinaciclib耐藥性良好，且最高劑量處理組中體重?fù)p失最高為5%。Dinaciclib在體內(nèi)具有抗癌活性，存在劑量依賴性，按低于MTD(最高耐受劑量)的劑量水平處理，幾乎完全抑制腫瘤生長(zhǎng)。Dinaciclib作用于小鼠，具有短暫的血漿半衰期。

臨床實(shí)驗(yàn)

N/A

特征

N/A

酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

方法

設(shè)計(jì)從Sf9細(xì)胞中純化的重組cyclin/CDK 全酶，產(chǎn)生表達(dá)特定cyclin 或CDK的桿狀病毒。在含 50mM Tris-HCl(pH 8.0)、10mM MgCl₂、1mM DTT和0.1mM原釩酸鈉的反應(yīng)buffer中，Cyclin/CDK復(fù)合體稀釋成終濃度為50μg/ml。每種激酶反應(yīng)中，1μg酶和20μl 2μM 底物溶液(組蛋白H1衍生的一種生物素化的肽段)混合，然后與10μl稀釋的Dinaciclib結(jié)合。加入50μl 2μM ATP和0.1μCi 33P-ATP反應(yīng)開(kāi)始。激酶反應(yīng)在室溫下進(jìn)行1小時(shí)，然后加入0.1% Triton X-100，1mM ATP，5mM EDTA和5mg/ml鏈霉親和素包被的SPA磁珠而終止反應(yīng)。使用96-孔GF/B過(guò)濾板和Filtermate廣譜收集器收集SPA磁珠。用2M NaCl沖洗磁珠兩遍，然后用含磷酸的2M NaCl再?zèng)_洗兩遍。使用TopCount 96孔液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定信號(hào)。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞系

A2780細(xì)胞

濃度

0μM-5μM

處理時(shí)間

24小時(shí)

方法

A2780細(xì)胞培養(yǎng)在含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基上，每周移動(dòng)兩次，通過(guò)使用胰蛋白酶-EDTA分離單細(xì)胞層。在96孔Cytostar-T板上每孔加入100μl A2780細(xì)胞(5×10³個(gè))，然后在37℃下溫育16到24小時(shí)。Dinaciclib在含2% 14C標(biāo)記dThd的完全培養(yǎng)基上連續(xù)稀釋。培養(yǎng)基從Cytostar T板上轉(zhuǎn)移，按一式四份加入200μl多種Dinaciclib稀釋液，然后細(xì)胞在37℃下溫育24小時(shí)。使用閃爍親近法測(cè)定，在TopCoun上測(cè)量累積的放射性標(biāo)記物滲透率。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物模型

攜帶A2780腫瘤的裸鼠

配制

20%羥丙基-β-環(huán)糊精

劑量

8mg/kg，16mg/kg，32mg/kg和48mg/kg

給藥方式

腹腔注射

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

包裝

KL6628-10mM

Dinaciclib (CDK抑制劑)

10mM×0.2ml

KL6628-5mg

Dinaciclib (CDK抑制劑)

5mg

KL6628-25mg

Dinaciclib (CDK抑制劑)

25mg

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說(shuō)明書(shū)

1份