dNTP和引物清除劑
產(chǎn)品及特點本產(chǎn)品是基于酶學(xué)方法的一步法清除 dNTP 和引物的試劑,用于在 PCR 結(jié)束后去除 殘留的 dNTP 和引物,使 PCR 產(chǎn)物可以不經(jīng)過任何形式的回收而直接用于后續(xù)的測序 等反應(yīng)。本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 一步式操作,方便快捷。
2. 直接將本產(chǎn)品加入到 PCR 產(chǎn)物中,不需要經(jīng)過任何形式的回收、純化,避免了樣品 的損失。
3. 本產(chǎn)品跟幾乎所有 PCR 反應(yīng)體系兼容。
4. 經(jīng)本產(chǎn)品處理的 PCR 產(chǎn)物可直接用于 Sanger 測序、、NGS、SNP 分析、nested PCR 等實驗。
5. 本產(chǎn)品足夠處理 100 次 1ug 的 PCR 反應(yīng)液(1ug PCR 產(chǎn)物足夠 2 次 Sanger 測 序)。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 塑料袋包裝
dNTP 和引物清除劑 LM131141 100 uL(紅蓋)
使用手冊 LM131141sc 1 份
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
自備試劑 用于測序的 PCR 產(chǎn)物
使用方法
1. PCR 結(jié)束后,電泳檢測確認(rèn)只有單一 PCR 條帶,并且濃度不低于 20ng/uL(跟濃 度已知的 DNA marker 對比)。如果有雜帶,必須回收目的條帶,然后用回收的 DNA 為模板再次擴(kuò)增,直到得到單一條帶為準(zhǔn)。如果濃度不夠,則需要濃縮。
2. 取 5 μL PCR 產(chǎn)物加入到離心管中。注意:如果 PCR 濃度為 20ng/uL,5 uL 足 夠兩次測序反應(yīng)。此處僅以 5 uL 為例子。如果后續(xù)的測序反應(yīng)多于兩次,則 PCR 產(chǎn)物的用量和本產(chǎn)品的用量需要按比例增加。
3. 加入1μL 本產(chǎn)品,輕柔混勻。1uL本產(chǎn)品能處理1 ug PCR產(chǎn)物。
4. 在PCR儀上37℃孵育30分鐘(降解dNTP和引物),然后80℃15分鐘(滅活酶活性), 室溫自然冷卻。
5. 取3 μL反應(yīng)液進(jìn)行10 uL體系的測序反應(yīng)。
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