一站式RNA電泳套裝

產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是包括瓊脂糖、去離子甲醛、RNA 上樣液、電泳液等在內(nèi)的 RNA 電泳套裝，專門用于 RNA 電泳分析。可以進(jìn)行至少 10 次 mini 變性膠電泳。

1. 即開(kāi)即用，用戶不需要自己進(jìn)行 RNase 滅活、高壓滅菌、pH 調(diào)節(jié)等操作。

2. 與 Northern 雜交等后續(xù)反應(yīng)兼容。 
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝 
瓊脂糖 81105 5 g
超純水 100935 250 mL
甲醛 50-00-0 60 mL
RNAON（含 EB） 3130A 1.5 mL
RNARUN（MOPS 電泳緩沖液），10× 3150 100 mL
使用手冊(cè) 60904sc 1 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，但 RNAon 長(zhǎng)期需要-20℃保存，有效期一年。

自備試劑 EB (10 mg/mL)、DEPC 水。

使用方法注意：所有器皿（三角瓶，電泳槽，槍頭等）均需去除 RNase。強(qiáng)烈推薦使 用本公司的超強(qiáng)無(wú)毒的固相 RNase 清除劑。 

一、配制瓊脂糖甲醛變性膠（1.2%, 100 mL）

1. 在三角瓶中加入下列成份: 瓊脂糖 1.2 -1.5 g 無(wú)菌水 87 mL

2. 將瓊脂糖加熱融化后，加入 10 mL 10×RNArun（注意：10×RNArun 即 10×MOPS 電泳緩沖液，瓶子一旦打開(kāi)，就很容易產(chǎn)生污染細(xì)菌，細(xì) 菌大量繁殖后會(huì)釋放大量 RNase，所以剩下的 10×RNArun -20℃ 放置）。

3. 待膠冷卻至 60?C 左右，再加下列成份: 甲醛 3.0 mL 自備 EB (10 mg/mL) 2-4 ?L 注意：由于本試劑盒提供的 RNAon 中含 EB，所以也可以不加 EB，但 效果較差。如果使用自備的其他染料，如 SYBR Green I，則不能同時(shí)使 用其他染料，包括含 EB 的 RNAon，用戶需要另購(gòu)不含 EB 的 RNAon）。

4. 混勻后倒膠, 凝固半小時(shí)后即可以使用。

二、配制電泳液

5. 將 RNArun 用超純水稀釋十倍后即成電泳液，所需要的體積根據(jù)使用的 電泳槽決定。

三、變性 RNA 樣品 

6. 在一干凈的離心管中將 5-10 uL RNA 和 15 uL RNAon 混合，85℃保溫 10 分鐘后冰浴 5-10 分鐘，直接上樣。注意：每一泳道至多可分析 30 ?g RNA，通常用 10-20 ?g 總 RNA 進(jìn)行 Northern 雜交，可以檢測(cè)高豐度 mRNA（占 mRNA 總量的 0.1%以上）；如待測(cè) RNA 含量極微，每個(gè)泳 道需加 0.5-3.0 ?g poly(A)+ RNA。

四、電泳

7. 電泳時(shí)，將凝膠預(yù)電泳 5 min（電壓為 5 V/cm）。隨后加樣品和分子量 對(duì)照(如果有的話)，以 3－4 V/cm 的電壓電泳，直至染料遷移至膠下游 的 3/4 處。

8. 電泳結(jié)束后，在 300 nm 紫外燈下拍照。 五、后續(xù)處理

9. 按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行 Northern 雜交等后續(xù)處理。