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一站式DNA非變性PAGE電泳套裝,One-Stop Native PAGE Pack
  • 一站式DNA非變性PAGE電泳套裝,One-Stop Native PAGE Pack

一站式DNA非變性PAGE電泳套裝

價(jià)格 1190
包裝 30次
最小起訂量 30次
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-23
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產(chǎn)品詳情

中文名稱:一站式DNA非變性PAGE電泳套裝英文名稱:One-Stop Native PAGE Pack
保存條件: 常溫運(yùn)輸和保存純度規(guī)格: 99.99%
產(chǎn)品類別: 分子生物學(xué) 核酸電泳及回收
2024-12-23 一站式DNA非變性PAGE電泳套裝 One-Stop Native PAGE Pack 30次/1190RMB 1190 常溫運(yùn)輸和保存 99.99% 分子生物學(xué) 核酸電泳及回收

一站式DNA非變性PAGE電泳套裝

 

產(chǎn)品及特點(diǎn)非變性 PAGE 電泳是研究 SSCP-PCR(single-strand conformationpolymorphism-PCR、單鏈 PCR 片段構(gòu)象多態(tài)性)和凝膠滯阻(Gel Shift)的重要研究手段,因?yàn)樵诜亲冃?PAGE 中,DNA 的遷移率除跟長(zhǎng)短相關(guān)外,還跟其構(gòu)象和結(jié)合的蛋白質(zhì)相關(guān)。本產(chǎn)品就是專門用于非變性 PAGE 的試劑,它具有下列特點(diǎn):

1. 一站式,用戶只需要準(zhǔn)備去離子水和樣品,十分方便。

2. 安全,免去了實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。

3. PAGE 電泳后可直接用于銀染等后續(xù)試驗(yàn)。\
規(guī)格及成分 成份 編號(hào) 大紙盒包裝 
保存 丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺 (29:1) 100876 60 g(250mL 棕色 塑料瓶) 常溫 TEMED 100880 1.5 mL(棕色管) 常溫 過硫酸銨(干粉) 100879 1 g 常溫 DNA 非變性 PAGE 上樣液 100875 1.5 mL -20℃ 10×TBE 90313 250 mL 常溫 使用手冊(cè) 100205sc 1 份 常溫
注:TEMED 和過硫酸銨(干粉)放一個(gè)熱封袋,DNA 非變性 PAGE 上樣液 放另一個(gè)熱封袋,低溫單獨(dú)存放。 

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸,收到貨后各成分的保存條件見上表,有效期一年。

自備試劑 去離子水、核酸銀染試劑盒

使用方法 用于 SSCP-PCR 分析的非變性 PAGE 電泳(其他應(yīng)用請(qǐng)相應(yīng)修改參數(shù))

一、PAGE 濃度的選擇:好使用濃度為 5-12%的丙烯酰胺膠,因?yàn)镾SCP-PCR 的擴(kuò)增長(zhǎng)度一般在 150-200bp 之間,而 5%的 PAGE 的有效分辨范圍為 80-500bp、8%的 PAGE 的有效分辨范圍為 60-400bp、12%的 PAGE 的有效分辨范圍為 40-200bp。

二、體積的選擇:SSCP-PCR 檢測(cè)需要長(zhǎng)約 30-40cm 的測(cè)序膠板,可以結(jié)合梳子的厚度,計(jì)算所需 PAGE 膠的體積。

操作:

1. 配制 PAGE 膠(下面以配制 100 mL PAGE 膠為例計(jì)算用量,配制更大體積的膠則需以此用量為基礎(chǔ)按比例增加)

A:新鮮配制 10%的 APS(過硫酸銨):按每 0.1 克過硫酸銨干粉加 1mL去離子水的比例將水加到裝有硫酸銨干粉的 1.5 mL EP 管中,搖晃到粉末全部溶解。配制好的 10%的 APS 溶液可以在 4℃存放一周。

B:新鮮配制 30%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1 的 AB 溶液,下同):在本產(chǎn)品提供的裝有 60g 丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺干粉的250mL 棕色塑料瓶中加入 146 mL 自備的去離子水,充分搖晃直到溶解(約需 10-20 分鐘),即得到 30%的 AB(29:1)溶液。此溶液好在一個(gè)月內(nèi)用完,4℃保存。

C:配 SSCP PAGE 膠:在一個(gè) 250mL 的三角瓶中,先按下表的用量加入去離子水、30% AB 溶液和 10×TBE 緩沖液。丙烯酰胺單體溶液具有神經(jīng)毒性,一定要戴手套操作。

C:搖晃混勻。好能抽真空 10-15 分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應(yīng)),無條件也可以不脫氧。

D:加入 500uL 10%APS 和 100uL TEMED,迅速搖勻后倒膠。

E: 在膠的液面距離達(dá)到頂部時(shí)停止灌膠,插入梳子。

F: 室溫聚合 30-60 分鐘(低溫抑制聚合反應(yīng),故好室溫)。

G: 待膠凝固后拔出梳子,用 1×TEB 液沖洗加樣孔。

H: 放 4℃冰箱預(yù)冷 30 分鐘-12 小時(shí)。為了防止 PAGE 膠收縮,好在其頂部加少量 1×TBE 緩沖液。使用預(yù)冷的 PAGE 膠有利于單鏈 DNA 在電泳時(shí)保持其構(gòu)型,這些構(gòu)型靠 DNA 序列間的鏈內(nèi)互補(bǔ)形成,對(duì)溫度很敏感。

2. 將預(yù)冷的凝膠板固定在電泳裝置上,往上槽和下槽中加入足夠 1×TEB 電泳液。

3. 取 3-5 uL SSCP-PCR 樣品,加入等體積 2×非變性 PAGE 上樣液,85℃處理 5 分鐘后冰浴。用前短暫離心后取 2 uL 上樣。上樣量跟檢測(cè)方法的靈敏度相關(guān),上述上樣量是針對(duì)核酸銀染檢測(cè)法。

4. 連接電源線,打開電源開關(guān)。如果 PAGE 中不含甘油,則使用 25W 的功率,電泳 5-7 小時(shí)(對(duì) 3-40cm 長(zhǎng)的 PAGE 膠而言)。如果使用含甘油的PAGE,則使用 8W 的功率,電泳 16-18 小時(shí)。由于溫度變化過大會(huì)改變DNA 構(gòu)型,所以電泳時(shí)好能保持恒溫。對(duì)不含甘油的 PAGE,好恒溫在 4℃、對(duì)含甘油的 PAGE,好恒溫在 25℃。

5. 終止電泳,取出凝膠進(jìn)行后續(xù)的銀染處理。不建議使用靈敏度低于銀染的方法,因?yàn)?SSCP 異構(gòu)體的數(shù)量都比較少,一般方法沒法檢測(cè)到。

關(guān)鍵字: 一站式DNA非變性PAGE電泳套裝廠家;一站式DNA非變性PAGE電泳套裝價(jià)格;一站式DNA非變性PAGE電泳套裝說明書

公司簡(jiǎn)介

上海澤葉生物科技有限公司是一家服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè),主要為科研機(jī)構(gòu)、高校、院所及企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)研究提供所需要的科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)等。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、材料科學(xué),通用試劑、藥物合成試劑、手性化合物、催化劑及配體、分析試劑、生物試劑,檢測(cè)試劑等等
成立日期 2016-08-08 (9年) 注冊(cè)資本 100萬元整
員工人數(shù) 1-10人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 100萬以內(nèi)
主營(yíng)行業(yè) 生物化工,有機(jī)原料,化學(xué)試劑,醫(yī)藥原料,技術(shù)服務(wù) 經(jīng)營(yíng)模式 貿(mào)易,試劑,定制,服務(wù)
  • 上海澤葉生物科技有限公司
VIP 6年
  • 公司成立:9年
  • 注冊(cè)資本:100萬元整
  • 企業(yè)類型:貿(mào)易
  • 主營(yíng)產(chǎn)品:主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA試劑盒、重組蛋白、抗體、生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、分子生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)等科研用品
  • 公司地址:松江區(qū)新橋鎮(zhèn)賣新公里2077號(hào)8309室
詢盤

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產(chǎn)品名稱 價(jià)格   公司名稱 報(bào)價(jià)日期
¥1190
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