非凍型細菌RNA保存夜
產(chǎn)品特點:
1. 操作簡單,將組織剪薄浸沒在RNA保存液中即可使其RNA不被降解。
2. 替代液氮,使樣品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。
3. RNA完整,因本產(chǎn)品能迅速抑制組織中RNA酶的活性,故從中提取的RNA的質(zhì)量跟液氮保存的樣品相比不相上下。
4. 方便運輸,處理過的樣品能在 25℃保存一周,使樣品郵寄和運輸變得容易和便宜,有利學術合作和交流。
5. 反復凍融,經(jīng)本產(chǎn)品處理的樣品可反復凍融20次,其間可對樣品進行各種處理而不影響最終提取的RNA的質(zhì)量。
6. 結果準確,本產(chǎn)品進入細胞十分快速,基因表達在發(fā)生應急改變前就得以鎖定,故RNA分析更能反映取樣時的真實情況。
7.可比性強,本產(chǎn)品能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差,增加各次實驗數(shù)據(jù)間的可比性,對大規(guī)模基因表達譜的分析尤其有用。
8. 兼容性廣,雖然處理過的樣品可以使用動物RNA提取試劑盒和TRIzol等試劑提取其RNA,樣品還可直接用于組織切片,免疫學和流式細胞分析而不影響RNA提取的質(zhì)量。
儲存條件:
常溫運輸及保存,有效期二年。
保存液使用方法:
一:用本產(chǎn)品保存新鮮組織樣品
1. 估計完全浸沒樣品所需要本產(chǎn)品的體積(1g組織需10mL)。
2. 標記收集管并加入估計所需量的本產(chǎn)品。
3.以最快速度將樣品剪切成厚度小于0.5cm的碎塊。
注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質(zhì)保護層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產(chǎn)品中保存,有蠟質(zhì)保護層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
4. 將組織碎塊完全浸沒于收集管的本產(chǎn)品中。
5. 將收集管存放于溫度適當?shù)牡胤?,存放時間不能超過該溫度下的最長存放時間,如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在 4℃放置過夜后再轉移到*的溫度。注:將樣品轉移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護液。常見存放溫度與其最長存放時間關系為如下:
保存溫度 時間及效果
37℃ 一天(保存三天的樣品 RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存兩周的樣品 RNA有輕微降解)
2-8℃ 一個月
-20℃和-80℃ 長期
6.從存放處取出樣品(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化),用消過毒的鑷子將組織碎塊從保護液中取出。
7. 立即開始RNA提取或進行其他處理(如將樣品分割成更小的碎塊再重新保存等)。注:樣品可以反復凍融二十次而其 RNA 質(zhì)量不會受到影響。
二:本產(chǎn)品保存培養(yǎng)細胞、懸浮細胞、細菌和RNA 病毒
1. 標記收集管。
2. 將待樣品轉移到離心管中,離心收集細胞,棄上清。注:處理含病毒的樣品(如血漿)可直接從步驟第4 步開始。
3. 用冰浴的緩沖液洗一次。
4. 將細胞懸浮在少量緩沖液中。
5. 加入五到十倍體積的本產(chǎn)品,混均; 對病毒樣品,加入兩到三倍體積的本產(chǎn)品,混均。
6. 將收集管存放于溫度適當?shù)牡胤剑娣艜r間不能超該溫度下的最長存放時間。
如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置過夜后再轉移到*溫度條件(將樣品轉移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護液)。注:樣品存放溫度與其最長存放時間關系為如下:
保存溫度 時間及效果
37℃ 一天(保存三天的樣品 RNA 有部分降解)
18-25℃ 一周(保存兩周的樣品 RNA 有輕微降解)
2-8℃ 一個月-20℃和-80℃ 長期
7. 取出樣品,室溫下融化(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化)。
8. 加入一倍體積的預冷的緩沖液(如PBS),用常規(guī)離心法收集細胞并用緩沖液洗一次。病毒樣品可免去此步驟。
9.細胞直接用于RNA的提取或其他處理
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