非凍型血液DNA保存液

產(chǎn)品及特點(diǎn) 

本產(chǎn)品是在室溫條件下長(zhǎng)期保存用于 DNA 提取的血液樣品的保存液，它通過(guò)裂解細(xì)胞并高效抑制 DNase 的活性而達(dá)到長(zhǎng)期保證 DNA 分子的完整性。

1. 保存時(shí)間長(zhǎng)，可常溫保存血液 DNA 長(zhǎng)達(dá)六個(gè)月，尤其適合于野外血液樣品采集。

2. DNA 完整性好，純化后長(zhǎng)度在 20-50 Kb 之間。

3. DNA 無(wú)化學(xué)修飾，提得的 DNA 可用于酶切、電泳、Southern 雜交和 PCR 等

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

4. 適用于各種動(dòng)物血液（包括禽類(lèi)血液）。

5. 安全可靠，本產(chǎn)品無(wú)毒無(wú)害。

6. 使用簡(jiǎn)單，直接把新鮮的血液樣品與本產(chǎn)品混合即可。
運(yùn)輸及保存 室溫運(yùn)輸及保存，有效期兩年。

使用方法 一: 哺乳動(dòng)物血液（包括人血液）

1. 將抗凝血（1-10 mL）加入到適當(dāng)容量的塑料離心管中。

2. 加入等體積的血液 DNALOCKER，充分振蕩混合均勻。

3. 常溫閉光保存直到使用。

4. 提取 DNA 時(shí)，可以取出部分液體，用自備的蛋白酶 K（終濃度為 0.1 mg/mL）

37℃處理過(guò)夜，然后再用經(jīng)典的酚/氯仿抽提+乙醇沉淀方法得到 DNA。

二: 禽類(lèi)血液

1. 由于禽類(lèi)血液有核細(xì)胞量遠(yuǎn)高于哺乳動(dòng)物，血液的使用量很少，一般只有哺乳動(dòng)

物血液用量的 1/100 到 1/1000，所以需先用等體積的水將血液 DNALOCKER

稀釋?zhuān)缓笾苯訉⑶蓊?lèi)血液加入。其余操作同上。

疑難解答 Q：保存血液樣品時(shí)溫度越低越好嗎？

A：不是。Tegelstrom 曾比較了分別在-70℃, -20℃, 4℃保存了 6 個(gè)月的蛙血，發(fā)

現(xiàn)保存溫度越低，血液 DNA 的斷裂越嚴(yán)重（詳見(jiàn) Tegelstrom, 1989. Cold

room Storage of blood may be better than storage at -70℃. Fingerprint

News, 4:5-6）。

導(dǎo)致核酸降解的常見(jiàn)非酶因素

原因       機(jī)制

溶液中殘留重金屬離子            磷酸二脂鍵的斷裂

長(zhǎng)期存放/光照產(chǎn)生的自由基    磷酸二脂鍵的斷裂

UV                   形成嘧叮二聚體

DEPC           使 RNA 中沒(méi)配對(duì)的腺嘌呤羧甲基化,但對(duì) 雙鏈核酸危害小

高溫和低 pH    脫嘌啉反應(yīng)(depurination)

EB                  導(dǎo)致可見(jiàn)光對(duì) DNA 的光氧化 (photooxidation)

酚                  其氧化產(chǎn)物使磷酸二脂鍵斷裂

甲酰胺溶液      酸化后(pH 5)引起 RNA 降解

醚                殘留過(guò)氧化物使磷酸二脂鍵的斷裂

醇                殘留重金屬離子使磷酸二脂鍵的斷裂

4℃             短期保存的溫度

-20℃         如果溶液中有鹽,將使核酸產(chǎn)生大量斷裂

-70℃ 長(zhǎng)期保存的溫度,但冷凝狀態(tài)下自由 基的破壞更活躍