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一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒
  • 一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒

一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒

價(jià)格 390
包裝 1mL
最小起訂量 1mL
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25

產(chǎn)品詳情

中文名稱:一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒保存條件: -20℃
純度規(guī)格: 99.99%產(chǎn)品類別: PCR試劑盒
2024-12-25 一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒 1mL/390RMB 390 -20℃ 99.99% PCR試劑盒

一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒

產(chǎn)品及特點(diǎn) 

本產(chǎn)品是基于熒光探針檢測(cè)的即用型 RT-PCR 試劑盒,可以對(duì)靶 RNA 分子進(jìn)行實(shí)時(shí)定量 RT-PCR 分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。產(chǎn)品含有經(jīng)過(guò)優(yōu)化的緩沖液組分、逆轉(zhuǎn) 錄酶、熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶、Taq DNA 穩(wěn)定劑、dNTPs、MgCl2和穩(wěn)定劑等所有實(shí)時(shí)定 量 RT-PCR 所需要的成分,用戶只需加入 RNA 模板、引物和探針即可進(jìn)行探針?lè)▽?shí)時(shí)定量 RT-PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):1. 以 2×Mix 提供,用戶只需準(zhǔn)備模板、引物、探針和 ROX 染料(取決于 qPCR 儀器)即 可以進(jìn)行探針?lè)▽?shí)時(shí)定量 RT-PCR 實(shí)驗(yàn),非常方便快捷,降低了操作誤差。 2. 各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。靈敏度最高時(shí)可以達(dá) 到 50 拷貝/反應(yīng)(跟模板質(zhì)量,引物設(shè)計(jì)等相關(guān))。 3. 既可用于TaqMan探針qRT-PCR,也可以是分子信標(biāo)(molecular beacon)的qRT-PCR。 4. 靈敏度和專一性比染料法熒光定量 RT-PCR 更高。 5. 可用于基因表達(dá)分析、SNP 分析、拷貝數(shù)分析等實(shí)驗(yàn)。也可以用于定性檢測(cè)。 6. 本產(chǎn)品只能用于科研,1mL 足夠 100 次 20uL 體系的探針?lè)?qRT-PCR 反應(yīng)。 

規(guī)格及成分 1 mL 規(guī)格 成 份 編 號(hào) 塑料袋包裝 2×探針?lè)?qRT-PCR 緩沖液 190504a 1 mL(橙色蓋) 5×探針?lè)?qRT-PCR 酶混合液 190504b 0.2 mL(紅色蓋) 使用手冊(cè) 190504sc 1 份 10mL 規(guī)格 成 份 編 號(hào) 十孔盒包裝 2×探針?lè)?qRT-PCR 緩沖液 190504a 1 mL×10(橙色蓋) 5×探針?lè)?qRT-PCR 酶混合液 190504b 0.2 mL×10(紅色蓋) 使用手冊(cè) 190504sc 1 份 運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 不凍融時(shí)保存期限為 12 個(gè)月。如果需要每天使用,可在 4℃放置三周。 

自備試劑 RNA 模板、引物、TaqMan 探針、超純水。

使用方法1. 如果有 N 個(gè)樣品并且做定量分析,設(shè)置 N+7 個(gè)反應(yīng),多出的 7 個(gè)中,6 個(gè)是做標(biāo)準(zhǔn) 曲線的陽(yáng)性對(duì)照,一個(gè)是陰性對(duì)照(NC)。在 N+7 個(gè) PCR 管中,加入下列成分。如果是 做定性分析,則 6 個(gè)做標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品縮減成一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照(PC),用戶自己需要根據(jù)下 表進(jìn)行適當(dāng)修改(把 6 個(gè)標(biāo)曲反應(yīng)改成 1 個(gè)陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng))。 成分 N 個(gè)樣品管 6 個(gè)標(biāo)準(zhǔn) 曲線管 NC 管 2×探針?lè)?qRT-PCR 緩沖液 各 10 uL 各 10 uL 10 uL 自備引物 1(10uM) 各 1 uL 各 1 uL 1 uL 自備引物 2(10uM) 各 1 uL 各 1 uL 1 uL N 個(gè)自備模板 RNA 各 1-2 uL 不加 不加 自備陽(yáng)性對(duì)照模板(6 個(gè)梯度) 不加 各 1 uL(1 管 加 1 個(gè)梯度) 不加 陰性對(duì)照模板(水) 不加 不加 1 uL 自備探針(0.5uM) 各 1 uL 各 1 uL 1 uL 自備 50×ROX I 染料 或 自備 50×ROX II 染料(見注) 各 0.4 uL 各 0.4 uL 0.4 uL 5×探針?lè)?qRT-PCR 酶混合液 2 uL 2 uL 2 uL 補(bǔ)超純水到 20 uL 20 uL 20 uL 注,下列信息僅供參考,具體以 qPCR 儀器的使用手冊(cè)為準(zhǔn)。 1、不需要 ROX 的機(jī)型:Agilent MX3000 和 MX4000、iCycler IQ、LightCycler 480、,、 Smart Cycler System、Thermal Cycler Dice Real Time System 等型號(hào)的熒光 PCR 儀器 不需要加 ROX 染料,但加入的話也不會(huì)影響整個(gè) PCR 分析。 

2、需要使用 ROX I 的機(jī)型:ABI Prism7000、7300、7700、7900HT、Step One、Step One Plus。

3、需要使用 ROX II 的機(jī)型:ABI Prism7500、7500 Fast、MJ Opticon、MJ Chromo4、 Corbett RotorGene 3000。 2. 放入熒光 PCR 儀中進(jìn)行擴(kuò)增, 下表的擴(kuò)增參數(shù)僅供參考,一定需要根據(jù)靶分子長(zhǎng)度,引物 和探針的 Tm 值、標(biāo)記染料的種類等進(jìn)行調(diào)節(jié)。一般選擇三步法 PCR: 步驟 反應(yīng)參數(shù) 備注 逆轉(zhuǎn)錄(RT 步驟) 94℃ 30 分鐘 預(yù)變性 94℃ 2 分鐘 PCR(35-45 次循環(huán)) 94℃ 15 秒 靶分子 長(zhǎng) 度 最 好 在 80-200bp 55-65℃ 15-30 秒 在此步采集熒光信號(hào),通 道根據(jù)標(biāo)記染料決定 72℃ 30 秒 如果引物 Tm 值接近 60℃,也可以選擇兩步法 PCR: 步驟 反應(yīng)參數(shù) 備注 逆轉(zhuǎn)錄(RT 步驟) 94℃ 30 分鐘 預(yù)變性 94℃ 2 分鐘 PCR(35-45 次循環(huán)) 94℃ 15 秒 靶分子 長(zhǎng) 度 最 好 在 80-200bp 60℃ 30-60 秒 在此步采集熒光信號(hào),通 道根據(jù)標(biāo)記染料決定 

3. 數(shù)據(jù)處理如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA 濃度的 log 值,再推算 出其濃度。 如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),只判斷陽(yáng)性或陰性。一般情況下,陰性對(duì)照 Ct 大于或等 于 40(閾值需要以陰性對(duì)照的 Ct 值確定,此處為便于敘述以 40 為例,具體情況很可能 閾值不一樣)。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng),有典型擴(kuò)增曲線,Ct 值應(yīng)該小于或等于 30。 對(duì)待測(cè)樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽(yáng)性。如果在 35-40 之間,則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 40, 則為陽(yáng)性。 

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 染料法 qPCR MagicMix

關(guān)鍵字: 一步式探針?lè)╭RT-PCR試劑盒;PCR試劑盒

公司簡(jiǎn)介

上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾?,并在北京、廣東,江西,吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。
成立日期 2015-05-29 (10年) 注冊(cè)資本 100萬(wàn)元整
員工人數(shù) 50-100人 年?duì)I業(yè)額 ¥ 100萬(wàn)以內(nèi)
主營(yíng)行業(yè) 中間體,化學(xué)試劑,醫(yī)藥原料 經(jīng)營(yíng)模式 工廠
  • 上??道噬锟萍加邢薰?/span>
  • 公司成立:10年
  • 注冊(cè)資本:100萬(wàn)元整
  • 企業(yè)類型:廠家
  • 主營(yíng)產(chǎn)品:主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA試劑盒、重組蛋白、抗體、生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、分子生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)等科研用品
  • 公司地址:松江區(qū)新橋鎮(zhèn)賣新公路2077號(hào)3089室
詢盤

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