??????碧云天生產(chǎn)的Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(去垢劑兼容型)(Detergent Compatible Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)最常用的兩種蛋白濃度檢測(cè)方法之一Bradford法研制而成,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的快速、穩(wěn)定和高靈敏度,能兼容一系列常見(jiàn)去垢劑,并且檢測(cè)數(shù)據(jù)有很好的線性關(guān)系。本試劑盒的性能不僅優(yōu)于常規(guī)的Bradford法,和BCA法比也更加快速便捷。 ??????本試劑盒和常規(guī)的Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒相比可以兼容一系列常見(jiàn)的去垢劑,和BCA法相比,能兼容高濃度的還原劑,并且檢測(cè)速度極快,在檢測(cè)含去垢劑樣品蛋白濃度時(shí),比BCA法更加便捷。生命科學(xué)研究中的很多蛋白樣品都是含有去垢劑的,因此常規(guī)Bradford法的使用受到了很大的限制,通常只能使用可以兼容去垢劑但檢測(cè)比較耗時(shí)的BCA法。如果使用本試劑盒,不僅能兼容去垢劑,而且由于能立即顯色,檢測(cè)速度會(huì)比BCA法快很多。當(dāng)?shù)鞍讟悠分型瑫r(shí)含有一定濃度的去垢劑和還原劑時(shí),常規(guī)的Bradford法和BCA法就都不能使用了,而本試劑盒仍然是可以檢測(cè)的。 ??????Bradford法的原理是考馬斯亮蘭(Coommassie Brilliant Blue)G-250與蛋白質(zhì)的堿性和芳香族氨基酸特別是精氨酸 (Arginine)在酸性介質(zhì)中結(jié)合后,溶液轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色,溶液吸收峰從465nm遷移到595nm,顏色的變化與蛋白質(zhì)濃度成正比。因此,可通過(guò)檢測(cè)595nm處的吸光度對(duì)溶液中蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行測(cè)定。 ??????本試劑盒檢測(cè)速度極快,10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成,和BCA法相比大大縮短了檢測(cè)時(shí)間。 ??????本試劑盒檢測(cè)靈敏度高,最小蛋白檢測(cè)量達(dá)到0.5μg。 ??????本試劑盒測(cè)定蛋白濃度時(shí)不受較高濃度去垢劑的影響,可以很好地兼容1% Triton X-100、1% Tween 20、1% SDS、1% NP-40和1% Brij35等去垢劑,同時(shí)兼容碧云天生產(chǎn)的多種裂解液,包括 Western及IP細(xì)胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液(強(qiáng)) (P0013B)、RIPA裂解液(中)(P0013C)、RIPA裂解液(弱)(P0013D)、NP-40裂解液(P0013F)、SDS裂解液(P0013G)、Western及 IP細(xì)胞裂解液(無(wú)抑制劑) (P0013J)、RIPA裂解液(強(qiáng),無(wú)抑制劑) (P0013K) (參考圖1)。 ??????本試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系好。常規(guī)的Bradford法的標(biāo)準(zhǔn)曲線是非線性的。碧云天的本試劑盒進(jìn)行了精心優(yōu)化,不僅能兼容上述的去垢劑,還能確保10μl體積的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品在0.1-1.5mg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(參考圖1)。
??????圖1. 本試劑盒蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線及其兼容性的實(shí)測(cè)效果圖。A. 本試劑盒對(duì)于常見(jiàn)去垢劑的兼容性。B. 本試劑盒對(duì)于碧云天的多種裂解液的兼容性。蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制在圖中所示的溶液中進(jìn)行測(cè)試。圖中數(shù)據(jù)僅供參考,實(shí)際的檢測(cè)效果可能會(huì)略有不同。
??????與測(cè)定蛋白濃度的其它方法如BCA法和Lowry相比,本試劑盒測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,尤其是還原試劑和去垢劑的影響。樣品中β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇(DTT)的濃度可高達(dá)5mM。同時(shí)本試劑盒還能兼容上述各種常見(jiàn)的去垢劑。BCA法能耐受各種常見(jiàn)的去垢劑,但不能耐受高濃度的還原劑。 ??????每個(gè)試劑盒可以檢測(cè)800個(gè)樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃保存,一年有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)可以-20℃長(zhǎng)期保存。 注意事項(xiàng): ??????蛋白標(biāo)準(zhǔn)請(qǐng)?jiān)谌咳芙夂笙然靹?,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白?biāo)準(zhǔn)。 ??????將G250染色液(去垢劑兼容型)回復(fù)到室溫再使用,有利于提高檢測(cè)的靈敏度。 ??????需可檢測(cè)560-610nm之間波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀一臺(tái),檢測(cè)波長(zhǎng)為595nm。并需96孔板。。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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