??????碧云天生產(chǎn)的Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)最常用的兩種蛋白濃度檢測(cè)方法之一 Bradford法研制而成,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的快速、穩(wěn)定和高靈敏度,并且檢測(cè)數(shù)據(jù)有很好的線性關(guān)系。 ??????Bradford法的檢測(cè)原理是考馬斯亮藍(lán)(Coommassie Brilliant Blue)G-250與蛋白質(zhì)的堿性和芳香族氨基酸特別是精氨酸 (Arginine)在酸性介質(zhì)中結(jié)合后,溶液轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色,溶液吸收峰從465nm遷移到595nm,顏色的變化與蛋白質(zhì)濃度成正比。因此,可通過(guò)檢測(cè)595nm處的吸光度對(duì)溶液中蛋白質(zhì)濃度進(jìn)行測(cè)定。 ??????本試劑盒檢測(cè)速度極快,10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成,和BCA法相比大大縮短了檢測(cè)時(shí)間。 ??????本試劑盒檢測(cè)靈敏度高,最小蛋白檢測(cè)量達(dá)到0.5μg。 ??????本試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系好。常規(guī)的Bradford法的標(biāo)準(zhǔn)曲線是非線性的。碧云天的本試劑盒進(jìn)行了精心優(yōu)化,確保5μl體積的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品在0.1-1.5mg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(參考圖1)。
圖1. 本試劑盒蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)測(cè)效果圖。圖中數(shù)據(jù)僅供參考,實(shí)際的檢測(cè)效果可能會(huì)略有不同。
??????與測(cè)定蛋白濃度的其它方法如BCA法和Lowry相比,Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,尤其是還原試劑的影響。樣品中β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇(DTT)的濃度可高達(dá)5mM。但本試劑盒受略高濃度的去垢劑影響,需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20、60、80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用碧云天生產(chǎn)的Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒(去垢劑兼容型)(P0006C)或碧云天生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P0009, P0010, P0010S, P0011, P0012, P0012S)。 ??????Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒對(duì)樣品中各種物質(zhì)的詳細(xì)的兼容性,請(qǐng)參見(jiàn)碧云天如下網(wǎng)頁(yè): ??????http://www.beyotime.com/Compatibility Chart For Bradford Kit.pdf ??????每個(gè)試劑盒可以檢測(cè)1000個(gè)樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃保存,一年有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)可以-20℃長(zhǎng)期保存。 注意事項(xiàng): ??????蛋白標(biāo)準(zhǔn)請(qǐng)?jiān)谌咳芙夂笙然靹?,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白?biāo)準(zhǔn)。 ??????將G250染色液回復(fù)到室溫再使用,有利于提高檢測(cè)的靈敏度。 ??????需可檢測(cè)560-610nm之間波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀一臺(tái),檢測(cè)波長(zhǎng)為595nm。并需96孔板。 ??????本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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