??????EMSA突變探針-PPAR是用于EMSA(也稱gel shift)研究的PPAR consensus oligonucleotide的突變體??梢宰鳛镋MSA探針-PPAR的陰性對(duì)照,用于EMSA結(jié)合反應(yīng)中突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)等。這里所指的PPAR包括PPARα、PPARβ和PPARγ。 ??????EMSA突變探針-PPAR的序列如下: ??????5'-CAA AAC TAG CAC AAA GCA CA-3' ??????3'-GTT TTG ATC GTG TTT CGT GT-5' ??????EMSA突變探針-PPAR中PPAR的公認(rèn)的結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生了突變,從而使PPAR無(wú)法和該突變探針結(jié)合。在探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中,正常的標(biāo)記探針和PPAR的結(jié)合的條帶會(huì)被抑制;而在突變探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)(cold competition)中,正常的標(biāo)記探針和PPAR的結(jié)合的條帶不會(huì)被抑制。參考下圖。 圖1. 一個(gè)典型的EMSA/Gel- Shift分析圖 ??????1,陰性對(duì)照反應(yīng)(標(biāo)記探針);2,常規(guī)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針);3,探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記探針);4,突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記突變探針);5,Super-shift反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+目的轉(zhuǎn)錄因子的特異抗體)。 ??????一個(gè)包裝的突變探針,如果用于同位素標(biāo)記EMSA探針的突變探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng),可以進(jìn)行30-60個(gè)突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。 注意事項(xiàng): ??????避免加熱到40℃以上,溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無(wú)法用于EMSA研究。 ??????對(duì)于EMSA的詳細(xì)操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說(shuō)明。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?
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