EMSA突變探針-HIF-1α (1.75μM)
EMSA突變探針-HIF-1α是用于EMSA(也稱gel shift)研究的HIF-1α consensus oligonucleotide的突變體。可以作為EMSA探針-HIF-1α的陰性對照,用于EMSA結合反應中突變探針的冷競爭反應等。 EMSA突變探針-HIF-1α的序列如下: 5'-TCT GTA AAA GAC CAC ACT CAC CTC-3' 3'-AGA CAT TTT CTG GTG TGA GTG GAG-5' EMSA突變探針-HIF-1α中HIF-1α的公認的結合位點發(fā)生了突變,從而使HIF-1α無法和該突變探針結合。在探針冷競爭反應中,正常的標記探針和HIF-1α的結合的條帶會被抑制;而在突變探針冷競爭反應(cold competition)中,正常的標記探針和HIF-1α的結合的條帶不會被抑制。參考下圖。 圖1. 一個典型的EMSA/Gel- Shift分析圖 1,陰性對照反應(標記探針);2,常規(guī)反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針);3,探針冷競爭反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針+標記探針100倍量的未標記探針);4,突變探針的冷競爭反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針+標記探針100倍量的未標記突變探針);5,Super-shift反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針+目的轉錄因子的特異抗體)。 一個包裝的突變探針,如果用于同位素標記EMSA探針的突變探針冷競爭反應,可以進行30-60個突變探針的冷競爭反應。 包裝清單:
保存條件: -20℃保存,一年有效。 注意事項: 避免加熱到40℃以上,溫度過高會導致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。 對于EMSA的詳細操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說明。 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 使用說明: 1. 用于突變探針的冷競爭反應,可以參考如下反應體系: 突變探針的冷競爭反應:
Nuclease-Free Water
EMSA/Gel-Shift結合緩沖液(5X)
細胞核蛋白或純化的轉錄因子
未標記的突變探針
標記好的探針
總體積
如果使用更大體積的未標記的突變探針,Nuclease-Free Water的體積就要相應減少,使總體積保持不變。
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