??????碧云天的G6PDH活性檢測試劑盒(WST-8法) (G6PDH Activity Assay Kit with WST-8)是一種高靈敏度的基于WST-8的顯色反應(yīng)，通過比色法來檢測細(xì)胞、組織或其它樣品中G6PDH (glucose-6-phosphate dehydrogenase)酶活性的檢測試劑盒。
??????WST-8是MTT的一種升級替代產(chǎn)品，和MTT或其他MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT被一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高。WST-8和WST-1相比，檢測靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩(wěn)定。
??????本試劑盒使用便捷。使用細(xì)胞、組織等的裂解液即可進(jìn)行檢測，無需分離純化細(xì)胞、組織或其它樣品中的G6PDH。
??????本試劑盒檢測靈敏度高，線性范圍寬。可以每孔含量低至0.05mU的G6PDH，在1mU/ml (0.05mU/孔)至100mU/ml (5mU/孔)之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。
??????葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate?dehydrogenase，簡稱G6PDH或G6PD)可催化葡萄糖-6-磷酸(glucose-6-phosphate，G6P)轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖酸內(nèi)脂(6-phosphogluconate,?6-PG)，這是磷酸戊糖途徑(pentose?phosphate pathway, PPP)的個(gè)步驟，也是該途徑的限速步驟。磷酸戊糖途徑對于NADPH (還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，也稱為還原型輔酶II)和戊糖的生成至關(guān)重要。NADPH對于通過GSH的再生來調(diào)控氧化還原平衡以及脂肪酸生物合成來說都至關(guān)重要。所以G6PDH的缺乏會(huì)導(dǎo)致由于不能生成NADPH而引起的一些疾病，如新生兒黃疸、非免疫性溶血性貧血等。
??????本試劑盒可檢測樣品中的G6PDH的酶活性，具體原理如下：G6P在G6PDH的作用下氧化生成6-PG，在這一反應(yīng)過程中NADP⁺被還原為NADPH，生成的NADPH在電子耦合試劑1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium Methyl Sulfate)的作用下將WST-8還原生成橙黃色的formazan，在450nm左右有吸收峰。反應(yīng)體系中生成的formazan與樣品中G6PDH的活性呈正比關(guān)系。WST-8法檢測G6PDH的原理參考圖1。

??????本試劑盒適用于檢測細(xì)胞、組織以及其它適當(dāng)樣品(如血液、血清)中的G6PDH活性。
??????本試劑盒可以測定100個(gè)樣品。

保存條件：
??????-20℃保存，一年有效。顯色液(S0189-3)須-20℃避光保存。
注意事項(xiàng)：
??????經(jīng)檢測本試劑盒中的G6PDH (細(xì)菌來源)室溫存放72小時(shí)或反復(fù)凍融5次不影響其酶活性。但對于不同物種的G6PDH是否能耐受長時(shí)間的室溫存放或反復(fù)凍融須自行測試，初次檢測時(shí)盡量使用新鮮制備的樣品。
??????由于G6PDH提取液本身略顯粘稠，以該提取液作為稀釋液時(shí)，無論對標(biāo)準(zhǔn)品還是樣品進(jìn)行稀釋，在稀釋過程中務(wù)必確保稀釋均勻，否則易造成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)產(chǎn)生較大波動(dòng)。
??????在樣品加樣和混勻過程中，須盡量避免產(chǎn)生氣泡，以免影響最終的吸光度測定。
??????如果需要測定樣品中G6PDH的絕對活力而又不能非常嚴(yán)格地控制反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間，則每次檢測都需要設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線。
??????如果樣品溶液中G6PDH活性過高或過低，不在試劑盒的線性檢測范圍內(nèi)時(shí)，可適當(dāng)調(diào)整樣品或者提取液的用量。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。