產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品包裝 |
產(chǎn)品價(jià)格 |
D2711-100μg |
pCMV-N-mCherry (紅色熒光蛋白) |
100μg |
1086.00元 |
?????? pCMV-N-mCherry是碧云天自行研發(fā)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒,用于表達(dá)N端含mCherry (DsRed的突變體,一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子,可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的前面有一個(gè)mCherry的完整編碼序列,因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)N端含有mCherry標(biāo)簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位,也可以利用mCherry抗體來(lái)檢測(cè)或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性,不能使用GFP抗體檢測(cè)mCherry。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,可以使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
??????pCMV-N-mCherry質(zhì)粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
|
Position
|
CMV promoter
|
1-602
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
mCherry
|
677-1384
|
Multiple cloning site
|
1385-1474
|
T7 promoter and T7 primer binding site
|
1494-1515
|
SV40 polyA signal
|
1527-1910
|
f1 origin of ss-DNA replication
|
2048-2354
|
bla promoter
|
2379-2503
|
SV40 promoter
|
2523-2861
|
Neomycin/kanamycin resistance ORF
|
2896-3687
|
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
|
3688-4146
|
pUC origin
|
4275-4942
|
?????? pCMV-N-mCherry質(zhì)粒(4994bp)的圖譜如下:
??????pCMV-N-mCherry的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下:
SacI mCherry
|
651
|
GAGCTCTAGC
|
GCTACCGGTC
|
|
TGAGCAAGGG
|
|
|
|
CTCGAGATCG
|
CGATGGCCAG
|
|
ACTCGTTCCC
|
|
|
701
|
AACATGGCCA
|
TCATCAAGGA
|
GTTCATGCGC
|
TTCAAGGTGC
|
|
|
|
TTGTACCGGT
|
AGTAGTTCCT
|
CAAGTACGCG
|
AAGTTCCACG
|
|
|
751
|
CTCCGTGAAC
|
GGCCACGAGT
|
TCGAGATCGA
|
GGGCGAGGGC
|
|
|
|
GAGGCACTTG
|
CCGGTGCTCA
|
AGCTCTAGCT
|
CCCGCTCCCG
|
|
|
801
|
CCTACGAGGG
|
CACCCAGACC
|
GCCAAGCTGA
|
AGGTGACCAA
|
|
|
|
GGATGCTCCC
|
GTGGGTCTGG
|
CGGTTCGACT
|
TCCACTGGTT
|
|
|
851
|
CTGCCCTTCG
|
CCTGGGACAT
|
CCTGTCCCCT
|
CAGTTCATGT
|
|
|
|
GACGGGAAGC
|
GGACCCTGTA
|
GGACAGGGGA
|
GTCAAGTACA
|
|
|
901
|
GGCCTACGTG
|
AAGCACCCCG
|
CCGACATCCC
|
CGACTACTTG
|
|
|
|
CCGGATGCAC
|
TTCGTGGGGC
|
GGCTGTAGGG
|
GCTGATGAAC
|
|
|
951
|
TCCCCGAGGG
|
CTTCAAGTGG
|
GAGCGCGTGA
|
TGAACTTCGA
|
|
|
|
AGGGGCTCCC
|
GAAGTTCACC
|
CTCGCGCACT
|
ACTTGAAGCT
|
|
|
1001
|
GTGGTGACCG
|
TGACCCAGGA
|
CTCCTCCCTG
|
CAGGACGGCG
|
|
|
|
CACCACTGGC
|
ACTGGGTCCT
|
GAGGAGGGAC
|
GTCCTGCCGC
|
|
|
1051
|
CAAGGTGAAG
|
CTGCGCGGCA
|
CCAACTTCCC
|
CTCCGACGGC
|
|
|
|
GTTCCACTTC
|
GACGCGCCGT
|
GGTTGAAGGG
|
GAGGCTGCCG
|
|
|
1101
|
AGAAGAAGAC
|
CATGGGCTGG
|
GAGGCCTCCT
|
CCGAGCGGAT
|
|
|
|
TCTTCTTCTG
|
GTACCCGACC
|
CTCCGGAGGA
|
GGCTCGCCTA
|
|
|
1151
|
GACGGCGCCC
|
TGAAGGGCGA
|
GATCAAGCAG
|
AGGCTGAAGC
|
|
|
|
CTGCCGCGGG
|
ACTTCCCGCT
|
CTAGTTCGTC
|
TCCGACTTCG
|
|
|
1201
|
CGGCCACTAC
|
GACGCTGAGG
|
TCAAGACCAC
|
CTACAAGGCC
|
|
|
|
GCCGGTGATG
|
CTGCGACTCC
|
AGTTCTGGTG
|
GATGTTCCGG
|
|
|
1251
|
TGCAGCTGCC
|
CGGCGCCTAC
|
AACGTCAACA
|
TCAAGTTGGA
|
|
|
|
ACGTCGACGG
|
GCCGCGGATG
|
TTGCAGTTGT
|
AGTTCAACCT
|
|
|
1301
|
CACAACGAGG
|
ACTACACCAT
|
CGTGGAACAG
|
TACGAACGCG
|
|
|
|
GTGTTGCTCC
|
TGATGTGGTA
|
GCACCTTGTC
|
ATGCTTGCGC
|
|
BamHIHindIII
|
|
1351
|
CCACTCCACC
|
GGCGGCATGG
|
ACGAGCTGTA
|
|
AAGCTTCTGC
|
|
|
GGTGAGGTGG
|
CCGCCGTACC
|
TGCTCGACAT
|
|
TTCGAAGACG
|
|
EcoRIEcoRVSalIBglIIXhoIXbaISpeIApaI
|
1401
|
AGGAATTCGA
|
TATCGTCGAC
|
AGATCTCTCG
|
AGTCTAGAAC
|
TAGTGGGCCC
|
|
|
TCCTTAAGCT
|
ATAGCAGCTG
|
TCTAGAGAGC
|
TCAGATCTTG
|
ATCACCCGGG
|
??????pCMV-N-mCherry中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-mCherry)包括:
AclI
|
AflII
|
AscI
|
AsiSI
|
BaeI
|
BcgI
|
BlpI
|
BmgBI
|
BsiWI
|
BsmBI
|
BspEI
|
BspQI
|
BssHII
|
BstXI
|
BstZ17I
|
EarI
|
EcoNI
|
FseI
|
NotI
|
NruI
|
PmeI
|
PmlI
|
PpuMI
|
PshAI
|
PspXI
|
SacII
|
SapI
|
ScaI
|
SmaI
|
SwaI
|
TspMI
|
XmaI
|
XmnI
|
|
|
??????pCMV-N-mCherry中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-N-mCherry once)包括:
NdeI
|
CA`TA,TG
|
240
|
|
BglII
|
A`GATC,T
|
1421
|
SnaBI
|
TAC|GTA
|
346
|
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
1427
|
CspCI
|
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
|
382
|
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
1427
|
NheI
|
G`CTAG,C
|
597
|
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
1433
|
BmtI
|
G,CTAG`C
|
597
|
|
SpeI
|
A`CTAG,T
|
1439
|
SacI
|
G,AGCT`C
|
651
|
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
1445
|
Eco53kI
|
GAG|CTC
|
653
|
|
ApaI
|
G,GGCC`C
|
1445
|
AfeI
|
AGC|GCT
|
660
|
|
PvuI
|
CG,AT`CG
|
1525
|
AgeI
|
A`CCGG,T
|
664
|
|
BclI
|
T`GATC,A
|
1681
|
AhdI
|
GACNN,N`NNGTC
|
871
|
|
MfeI
|
C`AATT,G
|
1774
|
SbfI
|
CC,TGCA`GG
|
1032
|
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
1787
|
BbsI
|
GAAGACNN`NNNN,
|
1112
|
|
BtsI
|
GCAGTG,NN`
|
1861
|
PflMI
|
CCAN,NNN`NTGG
|
1113
|
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
1910
|
BbvCI
|
CC`TCA,GC
|
1215
|
|
DraIII
|
CAC,NNN`GTG
|
2137
|
Bpu10I
|
CC`TNA,GC
|
1215
|
|
SfiI
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2796
|
BsgI
|
GTGCAG(N)14,NN`
|
1269
|
|
ClaI
|
AT`CG,AT
|
2864
|
SgrAI
|
CR`CCGG,YG
|
1358
|
|
BspDI
|
AT`CG,AT
|
2864
|
XcmI
|
CCANNNN,N`NNNNTGG
|
1362
|
|
EagI
|
C`GGCC,G
|
2930
|
BsrGI
|
T`GTAC,A
|
1377
|
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
3142
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
1385
|
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
3142
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
1391
|
|
BsrDI
|
GCAATG,NN`
|
3257
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
1403
|
|
RsrII
|
CG`GWC,CG
|
3540
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
1411
|
|
BstBI
|
TT`CG,AA
|
3706
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
1415
|
|
BsaI
|
GGTCTCN`NNNN,
|
4013
|
AccI
|
GT`MK,AC
|
1416
|
|
PciI
|
A`CATG,T
|
4942
|
??????pCMV-N-mCherry質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下:
??????N-mCherry primer (1284-1303): 5′-AGTTGGACATCACCTCCCAC-3′
??????T7 primer (1494-1515): 5′-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3′
??????pCMV-N-mCherry的全序列信息:D2711 pCMV-N-mCherry-seq.txt
??????pCMV-N-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請(qǐng)參考圖1。
圖1. pCMV-N-mCherry質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場(chǎng)照片,右側(cè)為熒光照片。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
D2711-1μg
|
pCMV-N-mCherry (紅色熒光蛋白)
|
1μg
|
D2711-100μg
|
pCMV-N-mCherry (紅色熒光蛋白)
|
100μg
|
—
|
說(shuō)明書
|
1份
|
保存條件:
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng):
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。