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pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒),pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒)
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pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒)

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發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-08

產(chǎn)品詳情

中文名稱:pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒)英文名稱:pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒)
有效期: 一年產(chǎn)品類別: 菌種與質(zhì)粒 真核載體
2024-12-08 pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒) pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒) RMB 一年 菌種與質(zhì)粒 真核載體
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價格
D2802 pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒) 1μg 888.00元

??????pFastBac1-EGFP是以pFastBac1為基礎(chǔ)構(gòu)建的用于在昆蟲細(xì)胞表達EGFP的質(zhì)粒。在polyhedrin (PH)啟動子的作用下,可以高效啟動EGFP在昆蟲細(xì)胞(如Sf9和Sf21等)中的表達。
??????在采用Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)表達目的蛋白時,pFastBac1-EGFP可以用作監(jiān)測轉(zhuǎn)染、病毒包裝和目的蛋白表達效果的對照質(zhì)粒。表達的EGFP有很強的綠色熒光,在熒光顯微鏡下可以非常方便地觀察轉(zhuǎn)染、病毒包裝和表達的效果。
??????pFastBac1是基于Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)(Bac-to-Bac Baculovirus Expression System)而設(shè)計的表達載體。Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)是由Luckow等人于1993年發(fā)展的一種快速而有效產(chǎn)生重組桿狀病毒的方法。該系統(tǒng)主要包括以下兩個組分:(1)用于插入目的基因的pFastBac載體,目的基因如EGFP等插入后受桿狀病毒特異性啟動子(baculovirus-specific promoter) polyhedrin啟動子調(diào)控表達;(2)含桿狀病毒穿梭載體bacmid (bMON14272, 136kb)和輔助質(zhì)粒(helper plasmid,用于表達轉(zhuǎn)座必須的轉(zhuǎn)座蛋白)的大腸桿菌DH10Bac宿主菌株(D0346)。將pfastBac重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化該菌株可發(fā)生pfastBac重組質(zhì)粒中mini-Tn7元件和bacmid上的mini-attTN7發(fā)生轉(zhuǎn)座,從而形成重組的bacmid。位點特異的轉(zhuǎn)座會破壞宿主的lacZα基因,從而可通過藍白斑篩選重組克隆。PCR等方法鑒定重組克隆后,提取重組的bacmid轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞,可以產(chǎn)生重組桿狀病毒,并表達目的蛋白如EGFP等。擴增重組的桿狀病毒并感染昆蟲細(xì)胞,就可以大量表達純化目的蛋白了。
??????pFastBac1-EGFP質(zhì)粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
f1 origin 2-457
Ampicillin resistance gene 589-1449
pUC origin 1594-2267
Tn 7R 2511-2735
Gentamicin resistance gene 2802-3335
Polyhedrin promoter (PPH) 3904-4032
EGFP 4038-4757
SV40 polyadenylation signal 4794-5021
Tn 7L 5050-5215

??????pFastBac1-EGFP質(zhì)粒(5397bp)的圖譜如下:

??????pFastBac1-EGFP的詳細(xì)圖譜如下:

BamHI EGFP
4031
CGGATCC ATG
GTGAGCAAGG GCGAGGAGCT GTTCACCGGG
GTGGTGCCCA
GCCTAGG TAC
CACTCGTTCC CGCTCCTCGA CAAGTGGCCC
CACCACGGGT
4081 TCCTGGTCGA GCTGGACGGC GACGTAAACG GCCACAAGTT
CAGCGTGTCC
AGGACCAGCT CGACCTGCCG CTGCATTTGC CGGTGTTCAA
GTCGCACAGG
4131 GGCGAGGGCG AGGGCGATGC CACCTACGGC AAGCTGACCC
TGAAGTTCAT
CCGCTCCCGC TCCCGCTACG GTGGATGCCG TTCGACTGGG
ACTTCAAGTA
4181 CTGCACCACC GGCAAGCTGC CCGTGCCCTG GCCCACCCTC
GTGACCACCC
GACGTGGTGG CCGTTCGACG GGCACGGGAC CGGGTGGGAG
CACTGGTGGG
4231 TGACCTACGG CGTGCAGTGC TTCAGCCGCT ACCCCGACCA
CATGAAGCAG
ACTGGATGCC GCACGTCACG AAGTCGGCGA TGGGGCTGGT
GTACTTCGTC
4281 CACGACTTCT TCAAGTCCGC CATGCCCGAA GGCTACGTCC
AGGAGCGCAC
GTGCTGAAGA AGTTCAGGCG GTACGGGCTT CCGATGCAGG
TCCTCGCGTG
4331 CATCTTCTTC AAGGACGACG GCAACTACAA GACCCGCGCC
GAGGTGAAGT
GTAGAAGAAG TTCCTGCTGC CGTTGATGTT CTGGGCGCGG
CTCCACTTCA
4381 TCGAGGGCGA CACCCTGGTG AACCGCATCG AGCTGAAGGG
CATCGACTTC
AGCTCCCGCT GTGGGACCAC TTGGCGTAGC TCGACTTCCC
GTAGCTGAAG
4431 AAGGAGGACG GCAACATCCT GGGGCACAAG CTGGAGTACA
ACTACAACAG
TTCCTCCTGC CGTTGTAGGA CCCCGTGTTC GACCTCATGT
TGATGTTGTC
4481 CCACAACGTC TATATCATGG CCGACAAGCA GAAGAACGGC
ATCAAGGTGA
GGTGTTGCAG ATATAGTACC GGCTGTTCGT CTTCTTGCCG
TAGTTCCACT
4531 ACTTCAAGAT CCGCCACAAC ATCGAGGACG GCAGCGTGCA
GCTCGCCGAC
TGAAGTTCTA GGCGGTGTTG TAGCTCCTGC CGTCGCACGT
CGAGCGGCTG
4581 CACTACCAGC AGAACACCCC CATCGGCGAC GGCCCCGTGC
TGCTGCCCGA
GTGATGGTCG TCTTGTGGGG GTAGCCGCTG CCGGGGCACG
ACGACGGGCT
4631 CAACCACTAC CTGAGCACCC AGTCCGCCCT GAGCAAAGAC
CCCAACGAGA
GTTGGTGATG GACTCGTGGG TCAGGCGGGA CTCGTTTCTG
GGGTTGCTCT
4681 AGCGCGATCA CATGGTCCTG CTGGAGTTCG TGACCGCCGC
CGGGATCACT
TCGCGCTAGT GTACCAGGAC GACCTCAAGC ACTGGCGGCG
GCCCTAGTGA
HindIII
4731 CTCGGCATGG ACGAGCTGTA
CAAGTAA AAG
CTTGTCGAGA AGTACTAGAG
GAGCCGTACC TGCTCGACAT
GTTCATT TTC
GAACAGCTCT TCATGATCTC

??????pFastBac1-EGFP中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pFastBac1-EGFP)包括:

AatII Acc65I AfeI AflII AgeI ApaI AscI
AsiSI BbvCI BfuAI BlpI BmgBI BmtI BsiWI
BspDI BspMI BssHII BstAPI BstBI BstEII Bsu36I
ClaI CspCI Eco53kI EcoNI EcoO109I EcoRI FseI
KasI KpnI MluI NarI NdeI NheI NotI
NruI NsiI PacI PaeR7I PflMI PluTI PmeI
PmlI PpuMI PshAI PspOMI PspXI PstI PvuII
RsrII SacI SalI SbfI SexAI SfiI SfoI
SgrAI SmaI SpeI SphI SrfI StuI SwaI
TspMI XbaI XcmI XhoI XmaI ZraI

??????pFastBac1-EGFP中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pFastBac1-EGFP once)包括:

NgoMIV G`CCGG,C 127 BsmBI CGTCTCN`NNNN, 3182
NaeI GCC|GGC 129 PflFI GACN`N,NGTC 3228
BanII G,RGCY`C 157 Tth111I GACN`N,NGTC 3228
BsaHI GR`CG,YC 836 BbsI GAAGACNN`NNNN, 3757
PvuI CG,AT`CG 1005 SnaBI TAC|GTA 3881
FspI TGC|GCA 1153 AccI GT`MK,AC 3883
AlwNI CAG,NNN`CTG 1852 BstZ17I GTA|TAC 3884
BseYI C`CCAG,C 1960 BsmFI GGGAC(N)10`NNNN, 4000
TfiI G`AWT,C 2290 BamHI G`GATC,C 4032
SapI GCTCTTCN`NNN, 2381 NcoI C`CATG,G 4036
BspQI GCTCTTCN`NNN, 2381 HindIII A`AGCT,T 4758
MscI TGG|CCA 2709 MfeI C`AATT,G 4873
BstXI CCAN,NNNN`NTGG 2713 HpaI GTT|AAC 4886
SacII CC,GC`GG 2766 BclI T`GATC, 5022
BaeI ,(N)5`(N)10ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` 2798 AvrII C`CTAG,G 5037
EcoRV GAT,ATC 2825

??????pFastBac1-EGFP的全序列信息請參考碧云天的網(wǎng)站上該質(zhì)粒的信息。
??????pFastBac1-EGFP質(zhì)粒使用碧云天研發(fā)的LipoInsect?轉(zhuǎn)染試劑(C0551)轉(zhuǎn)染SF9細(xì)胞的效果參考圖1。

??????圖1. pFastBac1-EGFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH10Bac,獲得的重組bacmid用碧云天生產(chǎn)的LipoInsect?轉(zhuǎn)染試劑(C0551)轉(zhuǎn)染SF9細(xì)胞4天后的效果圖。左側(cè)為明場照片,右側(cè)為熒光照片。

??????關(guān)于昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)的蛋白表達與純化的詳細(xì)介紹,請見如下網(wǎng)頁: http://www.beyotime.com/support/insect cell.htm。
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D2802 pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒) 1μg
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??????-20℃保存。
注意事項:
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書面許可不得用于任何商業(yè)用途,也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

關(guān)鍵字: pFastBac1-EGFP (桿狀病毒包裝陽性對照質(zhì)粒)

公司簡介

碧云天由美國哈佛大學(xué)的留學(xué)人員創(chuàng)辦于2001年,為上海市高新技術(shù)企業(yè),公司核心團隊由來自美國哈佛大學(xué)、NIH、UCLA、香港大學(xué)、南京大學(xué)、中國科技大學(xué)、中國科學(xué)院等著名大學(xué)和科研機構(gòu)的高水平科研人員及默克、諾華等頂尖醫(yī)藥企業(yè)的管理人員組成。十多年來,碧云天已經(jīng)成為世界一流的生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒和消耗品的研發(fā)和生產(chǎn)企業(yè),同時提供生命科學(xué)研究的技術(shù)服務(wù)和一站式實驗儀器設(shè)備采購平臺。目前已有近50000篇注明使用碧云天產(chǎn)品的研究論文發(fā)表在包括Nature、Cell等國際高水平學(xué)術(shù)期刊,日均逾33.37篇!碧云天將繼續(xù)致力于科研用技術(shù)和產(chǎn)品的研發(fā),用我們最頂尖的技術(shù)、最成熟的產(chǎn)品、最熱情的服務(wù),服務(wù)科研人員,造福生命健康
成立日期 2007-07-19 (18年) 注冊資本 1000.000000萬人民幣
員工人數(shù) 500人以上 年營業(yè)額 ¥ 500萬-1000萬
主營行業(yè) 生化試劑,核苷,核苷酸,寡核苷酸,抗體,蛋白組學(xué),生物活性小分子 經(jīng)營模式 試劑
  • 碧云天生物技術(shù)有限公司
非會員
  • 公司成立:18年
  • 注冊資本:1000.000000萬人民幣
  • 企業(yè)類型:有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
  • 主營產(chǎn)品:生物領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)研發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?;瘜W(xué)試劑(除危險品),實驗室消耗品,實驗室儀器設(shè)備的生產(chǎn)和銷售,從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務(wù)。
  • 公司地址:上海市松江區(qū)新飛路1500弄30號
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