大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的,大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞從正常大鼠血管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以用于表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
細(xì)胞傳代: 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
1. 顯微鏡下觀察細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞懸浮成“神經(jīng)球”生長,通常情況下,每兩天換液一次,每四天傳代一次。 2. 在生物安全柜或者超凈臺(tái)中,將培養(yǎng)瓶中的含有神經(jīng)球的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到15ml離心管中。 3. 500rpm離心5分鐘,收集神經(jīng)干細(xì)胞。 4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超凈工作臺(tái)中輕輕吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是縮小神經(jīng)球的體積,不要消化能單個(gè)神經(jīng)干細(xì)胞,那樣會(huì)影響其生長速度。 5. 然后加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后1000rpm 離心5分鐘。 6. 離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:2-1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞復(fù)蘇: 1. 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物 取出凍存管后,投入37℃水浴中,震蕩解凍2 min。 2. 酒精消毒管壁外側(cè)后,將其轉(zhuǎn)入超凈臺(tái)中,將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入5 ml 37℃預(yù)熱的DMEM/F12+10%FBS培養(yǎng)基。 3. 將離心管離心(1000rpm,5 min)。 4. 棄去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 細(xì)胞凍存:液氮凍存(凍存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。 細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(凍存管)/ 常溫運(yùn)輸(T-25培養(yǎng)瓶)
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