人間質(zhì)干細胞誘導(dǎo)成脂分化試劑盒
產(chǎn)品基本信息
Applied CellTM 人間質(zhì)干細胞誘導(dǎo)成脂分化試劑盒
基礎(chǔ)培養(yǎng)基2-8℃，添加劑-20--80℃保存；
混合后2-8℃保存，2-3周內(nèi)使用完畢
產(chǎn)品簡介
人間質(zhì)干細胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒是埃澤思生物（Applied CellTM）自主研發(fā)的一款用于人間質(zhì)干細胞誘導(dǎo)分化成脂的試劑盒，可用于骨髓、臍帶、脂肪等組織來源的間充質(zhì)干細胞的誘導(dǎo)成脂分化。本產(chǎn)品僅限于科學研究，不能用于臨床診斷、治療，以及其他用途。
人間充質(zhì)干細胞脂肪維持基礎(chǔ)培養(yǎng)基
人間充質(zhì)干細胞脂肪維持培養(yǎng)添加劑
四、產(chǎn)品特性
l 誘導(dǎo)分化程序簡單便捷。
l 誘導(dǎo)成脂細胞效率高。
五、操作方法
1. 相關(guān)材料
? Xeno-Free 人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基（Applied Cell?:AC-1001003）
? 人間充質(zhì)干細胞成脂分化試劑盒（Applied Cell?:AC-1001029）
? 成脂檢測染液（Applied Cell?:AC-1001022）
? 細胞消化液（Applied Cell?:AC-1001024）
? 磷酸鹽緩沖液(1×) （Applied Cell?: Cat.AC-1001037）
2. 實驗準備
人間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基的配制
2.1. 在 2-8℃解凍人間充質(zhì)干細胞成脂分化添加劑，輕晃搖勻；
2.2. 隨后將添加劑加入到人間充質(zhì)干細胞成脂分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基中（10ml 添加劑與 90mL 基礎(chǔ)培養(yǎng)基徹底混合）混勻，即為人間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基。人間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基可在2-8℃穩(wěn)定儲放 2 周。
注意：人間充質(zhì)干細胞脂肪維持添加劑只能在 2-8℃解凍，待添加劑加入到培養(yǎng)基以后，請用培養(yǎng)基潤洗添加劑瓶 1-2 次，因添加劑量較少可防止添加劑粘附在試管壁上造成損失。
3. 實驗操作
誘導(dǎo)成脂（以 6 孔板為例）
3.1. 將傳代或復(fù)蘇凍存的人間充質(zhì)干細胞接種到 6 孔板上，密度為 2×105 -3×105 cells/cm2 或 2× 105 -3×105 cells/孔，置于 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
3.2. 當人間充質(zhì)干細胞融合度達到 80-90%時，開始誘導(dǎo)脂肪前體細胞分化。吸掉 Xeno-Free 人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基，每孔加 1ml 預(yù)熱 PBS 清洗一次，吸掉 PBS，加入 2 ml 人間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基，以此記為第 0 天；
注意：人間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基使用前需預(yù)熱至 37℃。
3.3. 每 1-2 天更換人間充質(zhì)干細胞成脂分化培養(yǎng)基；
3.4. 第 5-6 天可以看到少量脂滴；
3.5. 第 9-14 天待脂肪滴顆粒成熟即可進行拍照，染色。（根據(jù)情況誘導(dǎo)時間可適當延長）
注意：①培養(yǎng)基每 1-2 天換液。由于隨著脂肪細胞的成熟，pH 的降低會觀察到培養(yǎng)基變黃。pH 從 7 降到 6.5，細胞增殖會變慢。pH 在 6.5 到 6 時，細胞活力會降低。所以誘導(dǎo)后期， 需要每天換液。
②換液時盡量不使培養(yǎng)基變干，培養(yǎng)基變干會降低細胞層對培養(yǎng)皿表面的粘附。
③細胞分化效果和供體有關(guān)。供體的年齡是一個因素。有研究發(fā)現(xiàn)與年長者相比，年輕供體來源 的細胞的分化能力更強。
4. 成脂檢測染液染色
4.1. 每 6ml 成脂染液加入 4ml 蒸餾水制成染色工作液，混勻室溫放置 5-10 分鐘。加入蒸餾水后，染液會有片狀結(jié)晶析出，可用直接使用或濾網(wǎng)過濾除掉結(jié)晶。
4.2. 脂肪誘導(dǎo)分化結(jié)束后，吸掉原有培養(yǎng)基，用 1×PBS 沖洗 1-2 次。每孔加入適量細胞固定液， 固定 20 min。
4.3. 吸掉細胞固定液，用 1×PBS 沖洗 2 次。，加入適量染色工作液，使染液完全覆蓋脂肪滴，室溫染色 15min。
4.4. 吸掉染色工作液，用 1×PBS 沖洗 2-3 次。
4.5. 將培養(yǎng)板置于顯微鏡下觀察脂滴染色效果，拍照。
注意：染色后顯微鏡觀察，及時拍照。如果時間過長，脂肪滴會發(fā)生破裂。
關(guān)鍵字： 間充質(zhì)干細胞分化試劑盒;
上海埃澤思生物科技有限公司（ Applied Cell?）專注于治療用及生產(chǎn)用細胞培養(yǎng)產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)，目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細胞、免疫細胞培養(yǎng)，凍存以及分離等領(lǐng)域。為保證產(chǎn)品標準化、一致性，我們對所有產(chǎn)品進行嚴格的原料篩選及生產(chǎn)控制。目前，我公司已通過ISO9001：2015質(zhì)量管理體系認證。除提供產(chǎn)品支持，本公司的技術(shù)團隊還可為您提供及時有效的技術(shù)支持、技術(shù)咨詢，以及與您探討感興趣的科學問題和解決方案。最終我們希望通過高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)，不斷推動細胞治療、再生醫(yī)學以及藥物發(fā)展與創(chuàng)新，愿我們早日成為您在研發(fā)科研及應(yīng)用領(lǐng)域的忠誠合作伙伴。
公司愿景:
我們努力成為中國細胞培養(yǎng)領(lǐng)域最頂尖產(chǎn)品與服務(wù)提供商。
公司使命: