人間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成軟骨分化試劑盒
產(chǎn)品基本信息
Applied CellTM 人間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成軟骨分化試劑盒
基礎(chǔ)培養(yǎng)基2-8℃，添加劑-20--80℃保存；
混合后2-8℃保存，3周內(nèi)使用完畢
人間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成軟骨
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
人間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成軟骨分化試劑盒是埃澤思生物（Applied CellTM）自主研發(fā)的一款用于人類間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成軟骨的試劑盒，可用于骨髓、臍帶、脂肪等組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)成軟骨分化。本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，不能用于臨床診斷、治療，以及其他用途。
產(chǎn)品特性
誘導(dǎo)分化程序簡(jiǎn)單便捷。
誘導(dǎo)成軟骨細(xì)胞效率高。
產(chǎn)品內(nèi)容
人間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成軟骨分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基
人間質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成軟骨分化添加劑
五、操作方法
1. 相關(guān)材料
? Xeno-Free 人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基（Applied Cell?:AC-1001003）
? 人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化試劑盒（Applied Cell?:AC-1001028）
? 成軟骨檢測(cè)染液（Applied Cell?:AC-1001023）
? 細(xì)胞消化液（Applied Cell?:AC-1001024）
? 磷酸鹽緩沖液(1×) （Applied Cell?: Cat.AC-1001037）
2. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化培養(yǎng)基的配制：
2.1. 在 2-8℃解凍人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化添加劑，輕晃搖勻；
2.2. 將添加劑加入到人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基中（添加劑 10mL 與 90mL 基礎(chǔ)培養(yǎng)基徹底混合）混勻，即為人類間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化培養(yǎng)基。人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化培養(yǎng)基可 在 2-8℃穩(wěn)定儲(chǔ)存 2-3 周。
注意：人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化添加劑只能在 2-8℃解凍，待添加劑加入到培養(yǎng)基以后，請(qǐng)用培養(yǎng)基潤(rùn)洗添加劑試管 1-2 次，因添加劑量較少可防止添加劑粘附在試管壁上造成損失。
3. 實(shí)驗(yàn)操作
3.1. 誘導(dǎo)成軟骨球
3.1.1. 誘導(dǎo)成軟骨分化實(shí)驗(yàn)之前，用細(xì)胞消化液消化后計(jì)數(shù)；
3.1.2. 分配 0.5 mL 細(xì)胞懸液（2-3×105 個(gè)細(xì)胞）到 15mL 或 50mL 離心管中，300×g，離心 5min；
3.1.3. 吸掉上清，用 2-5mL 人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化培養(yǎng)基重懸沉淀。
3.1.4. 離心后擰松離心管蓋便于氣體交換，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第 2 天，細(xì)胞團(tuán)應(yīng)在離心管底部呈球形的團(tuán)狀；
注意：離心后不需要吸掉上清液，且不要隨意晃動(dòng)離心管。
3.1.5. 自接種時(shí)間開(kāi)始計(jì)算，每天更換人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化培養(yǎng)基；
注意：每次換液時(shí)，輕輕的搖動(dòng)離心管或輕彈離心管底部確保細(xì)胞球沒(méi)有粘附到管壁上。第 4-5 天即會(huì)看到非常明顯軟骨球。
3.1.6. 15-21 天，軟骨球停止生長(zhǎng)，收獲軟骨球：吸掉人間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化培養(yǎng)基，用
PBS 洗 1 次。
3.2. 成軟骨檢測(cè)染液染色
3.2.1. 清洗：軟骨球用 PBS 清洗 2 次；
3.2.2. 固定：加 2mL 細(xì)胞固定液，固定 30min，水洗 2 次；
3.2.3. 染色：成軟骨檢測(cè)染液（AC-1001023）染色 5min；
3.2.4. 洗滌：dH2O 洗去多余的染料，軟骨球呈深藍(lán)色。切片染色：
3.2.5. 復(fù)水：將誘導(dǎo)分化的軟骨球切片浸泡在 100% (vol/vol) 乙醇中 2×5 min， 95% (vol/vol) 乙醇中 1×2min，70% (vol/vol)乙醇中 1×2 min；
3.2.6. 用流動(dòng)的水沖洗 30s；
3.2.7. 成軟骨染料染色 5min；
3.2.8. 用 dH2O 洗去多余的染料；
3.2.9. 脫水：浸泡在 95% (vol/vol) 乙醇中 2×5min，在 100% (vol/vol) 乙醇中 2×5min;
3.2.10. 用二甲苯清洗 3×2 min；
3.2.11. 用中性樹(shù)膠封片，用顯微鏡觀察并拍照。
關(guān)鍵字： 間充質(zhì)干細(xì)胞分化試劑盒;
上海埃澤思生物科技有限公司（ Applied Cell?）專注于治療用及生產(chǎn)用細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)，目前公司產(chǎn)品已經(jīng)涵蓋干細(xì)胞、免疫細(xì)胞培養(yǎng)，凍存以及分離等領(lǐng)域。為保證產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化、一致性，我們對(duì)所有產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格的原料篩選及生產(chǎn)控制。目前，我公司已通過(guò)ISO9001：2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證。除提供產(chǎn)品支持，本公司的技術(shù)團(tuán)隊(duì)還可為您提供及時(shí)有效的技術(shù)支持、技術(shù)咨詢，以及與您探討感興趣的科學(xué)問(wèn)題和解決方案。最終我們希望通過(guò)高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)，不斷推動(dòng)細(xì)胞治療、再生醫(yī)學(xué)以及藥物發(fā)展與創(chuàng)新，愿我們?cè)缛粘蔀槟谘邪l(fā)科研及應(yīng)用領(lǐng)域的忠誠(chéng)合作伙伴。
公司愿景:
我們努力成為中國(guó)細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域最頂尖產(chǎn)品與服務(wù)提供商。
公司使命: