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T4 Polynucleotide Kinase,T4 Polynucleotide Kinase
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T4 Polynucleotide Kinase

價(jià)格 詢(xún)價(jià)
包裝 100U
最小起訂量 100U
發(fā)貨地 上海
更新日期 2024-12-25

產(chǎn)品詳情

中文名稱(chēng):T4 Polynucleotide Kinase英文名稱(chēng):T4 Polynucleotide Kinase
有效期: 一年產(chǎn)品類(lèi)別: DNA操作 修飾酶
2024-12-25 T4 Polynucleotide Kinase T4 Polynucleotide Kinase RMB 一年 DNA操作 修飾酶
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價(jià)格
D7096
T4 Polynucleotide Kinase
100U
73.00元

??????T4 Polynucleotide Kinase,簡(jiǎn)稱(chēng)T4 PNK,中文名稱(chēng)T4多聚核苷酸激酶,是一種多聚核苷酸5'羥基激酶,可以催化ATP的γ位磷酸基團(tuán)向單鏈或雙鏈DNA、RNA、寡核苷酸或帶有3'磷酸基團(tuán)的單核苷酸的5'羥基轉(zhuǎn)移。其他NTP也可產(chǎn)生相同的反應(yīng):5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。
??????上述的磷酸化反應(yīng)是可逆的。當(dāng)缺失ATP并且存在A(yíng)DP的情況下,T4 Polynucleotide Kinase可以顯示出5'磷酸酯酶的活性,催化單鏈或雙鏈DNA、RNA、寡核苷酸或帶有3'磷酸基團(tuán)的單核苷酸的5'磷酸基團(tuán)向ADP的轉(zhuǎn)移形成ATP。其他NTP也可產(chǎn)生相同的反應(yīng):5'-P + NDP → 5'-OH + NTP(最適pH為6.4左右)。
??????當(dāng)ATP和ADP都適量存在時(shí),T4 Polynucleotide Kinase可以催化單鏈或雙鏈DNA、RNA、寡核苷酸或帶有3'磷酸基團(tuán)的單核苷酸的5'磷酸基團(tuán)和ATP的γ位磷酸基團(tuán)之間的交換反應(yīng)。其他NTP也可產(chǎn)生相同的反應(yīng):5'-P + NTP + NDP→5'-P + NDP + NTP。
??????T4 Polynucleotide Kinase同時(shí)具有3'磷酸酯酶活性,可催化3'磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化:3'-P → 3'-OH + Pi(最適pH為5.9左右)。
??????T4 Polynucleotide Kinase的激酶活性在C-末端附近,而磷酸酯酶活性在N-末端附近。
??????用途:寡核苷酸、DNA或RNA的5'末端標(biāo)記,用作Southern、Northern、EMSA等的探針,凝膠電泳的marker,DNA測(cè)序引物,PCR引物等;使寡核苷酸、DNA或RNA的5'端磷酸化,確保后續(xù)連接反應(yīng)順利進(jìn)行;催化3'磷酸化的單核苷酸的5'磷酸化,使該單核苷酸可以和DNA或RNA的3'末端連接;去除3'端磷酸基團(tuán)。
??????來(lái)源:由大腸桿菌表達(dá),表達(dá)基因的來(lái)源為T(mén)4嗜菌體。
??????活性定義:37℃30分鐘內(nèi),將轉(zhuǎn)移ATP上1 nmol γ-磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA 5'-OH末端所需的酶量定義為1個(gè)活性單位。
??????酶活性檢測(cè)條件:100mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgCl2,5mM DTT,0.5mM 5'-OH DNA,0.05mM ATP,
0.1MBq/ml [γ-33P]-ATP。
??????純度:不含DNA內(nèi)切酶和外切酶,不含RNA酶。
??????酶儲(chǔ)存溶液:20mM Tris-HCl(pH7.5),25mM KCl,0.1mM EDTA,2mM DTT,50% glycerol。
??????Reaction Buffer A(10X)(用于磷酸化反應(yīng)):500mM Tris-HCl(pH7.6 at 25℃),100mM MgCl2,50mM DTT,1mM spermidine,1mM EDTA。
??????Reaction Buffer B(10X)(用于交換反應(yīng)):500mM imidazole-HCl(pH6.4 at 25℃),0.18M MgCl2,50mM DTT,
1mM spermidine,1mM EDTA,1mM ADP。
??????緩沖液兼容性:在碧云天的內(nèi)切酶反應(yīng)緩沖液1X G、1X O、1X Y、2X Y中的活性為100%,在1X B、1X R中的活性為75-100%;在碧云天的Taq、Pfu DNA polymerase和M-MuLV反應(yīng)緩沖液中的活性為50-100%。
??????失活或抑制:75℃加熱10分鐘可使T4?Polynucleotide?Kinase失活,加入EDTA也可使T4 Polynucleotide Kinase失活。金屬離子螯合劑、磷酸鹽、銨根離子、大于50mM的KCl和NaCl均可顯著抑制T4 Polynucleotide Kinase的活性。
包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
包裝
D7096-1
T4 Polynucleotide Kinase(10U/μl)
100U
D7096-2
Reaction Buffer A(10X)
80μl
D7096-3
Reaction Buffer B(10X)
40μl
D7096-4
24% PEG Solution
40μl
說(shuō)明書(shū)
1份

保存條件:
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng):?
??????銨鹽沉淀獲得的DNA不能用于T4?Polynucleotide?Kinase的標(biāo)記反應(yīng)。銨鹽可強(qiáng)烈抑制T4?Polynucleotide?Kinase的酶活性。
??????PEG可促進(jìn)磷酸化反應(yīng)速率和效率;交換反應(yīng)體系應(yīng)加入PEG。?
??????酶使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
??????本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

關(guān)鍵字: T4 Polynucleotide Kinase

公司簡(jiǎn)介

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成立日期 2007-07-19 (18年) 注冊(cè)資本 1000.000000萬(wàn)人民幣
員工人數(shù) 500人以上 年?duì)I業(yè)額 ¥ 500萬(wàn)-1000萬(wàn)
主營(yíng)行業(yè) 生化試劑,核苷,核苷酸,寡核苷酸,抗體,蛋白組學(xué),生物活性小分子 經(jīng)營(yíng)模式 試劑
  • 碧云天生物技術(shù)有限公司
非會(huì)員
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  • 主營(yíng)產(chǎn)品:生物領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)研發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?;瘜W(xué)試劑(除危險(xiǎn)品),實(shí)驗(yàn)室消耗品,實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的生產(chǎn)和銷(xiāo)售,從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)。
  • 公司地址:上海市松江區(qū)新飛路1500弄30號(hào)
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