化學名

3-[2,4-dimethyl-5-[(Z)-(2-oxo-1H-indol-3-ylidene)methyl]-1H-pyrrol-3-yl]propanoic acid

簡稱

TSU-68

別名

SU-6668, Orantinib, SU 6668, SU6668

中文名

N/A

化學式

C₁₈H₁₈N₂O₃

分子量

310.35

CAS號

252916-29-3

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO62mg/ml; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.61ml DMSO，或者每3.1mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF5301-10mM用DMSO配制。

產品描述

TSU-68 (SU6668, Orantinib)有效作用于PDGFR自磷酸化，無細胞試驗中Ki為8nM，也強效抑制Flk-1和FGFR1反式磷酸化，對IGF-1R、Met、Src、Lck、Zap70、Abl和CDK2幾乎沒有抑制活性；對EGFR沒有抑制作用。Phase 3。

信號通路

Protein Tyrosine Kinase; Angiogenesis

靶點

PDGFRβ

FGFR1

Flk1

－

－

IC50

8nM(Ki)

1.2μM(Ki)

2.1μM(Ki)

－

－

體外研究

TSU-68是ATP競爭性抑制劑，作用于Flk-1/KDR磷酸轉移、FGFR1磷酸轉移和PDGFRβ激酶時，Ki分別為2.1μM、1.2μM和8nM。0.03-10μM　TSU-68作用于VEGF刺激的HUVECs，抑制KDR酪氨酸磷酸化。最低濃度為0.03-0.1μM的TSU-68作用于過量表達PDGFRβ的NIH-3T3 細胞，也抑制PDGF刺激的PDGFRβ酪氨酸磷酸化。10μM和更高濃度TSU-68抑制FGF酸性-誘導的FGFR1底物2的磷酸化。然而，高達100μM TSU-68作用于過量表達EGFR的NIH-3T3細胞，不抑制EGF刺激的EGFR酪氨酸磷酸化。TSU-68抑制VEGF驅動的和FGF驅動的HUVECs分裂，平均IC50分別為0.34和9.6μM。TSU-68作用于人類骨髓性白血病MO7E細胞，抑制肝細胞因子(SCF)受體c-kit的酪氨酸自磷酸化，IC50為0.1-1μM，也抑制ERK1/2磷酸化。TSU-68也抑制SCF刺激的MO7E細胞增殖，IC50為0.29μM，且誘導凋亡。

體內研究

TSU-68按75-200mg/kg劑量作用于攜帶多種移植瘤的無胸腺小鼠，包括A375、Colo205、H460、Calu-6、C6、SF763T和SKOV3TP5細胞，抑制細胞生長。TSU-68按75mg/kg劑量作用于C6神經膠細胞移植瘤，也阻斷腫瘤血管生成。TSU-68按200mg/kg劑量作用于HT29人類結腸癌腫瘤模型，降低腫瘤邊緣的平均血管通透性和腫瘤中心的平均血漿容積分數。TSU-68促進腫瘤周圍形成異?；|形成。TSU-68按200mg/kg劑量作用于兔VX2肝臟腫瘤模型，增加注射化學治療的效果。

臨床實驗

N/A

特征

TSU-68是有效的受體酪氨酸激酶Flk-1/KDR、PDGFRβ和FGFR1抑制劑。

酶活性檢測實驗

方法

測定Flk-1和FGFR1磷酸轉移活性的酪氨酸激酶實驗在預包被肽底物聚Glu,Tyr(4:1)的96孔板上進行，聚Glu,Tyr(4:1)溶于PBS，每孔加20μg，在4℃下溫育過夜。溶于PBS的1-5% (w/v) BSA阻斷過量的蛋白質結合位點。純化的GST-FGFR1(激酶域)或GST-Flk-1(胞漿區(qū)) 融合蛋白加到孔中，激酶稀釋buffer濃度為2×，含100mM HEPES，50mM NaCl，40μM NaVO₄和0.02% (w/v) BSA。作用于GST-Flk-1和GST-FGFR1的酶終濃度為50ng/ml。SU6668溶于DMSO，所需的終濃度為100×，且按1:25稀釋在H₂O中。25μl稀釋的SU6668隨后加到每個反應孔中。加入溶于MnCl₂溶液的不同濃度ATP開始激酶反應，MnCl₂終濃度為10mM。板在室溫下溫育5-15分鐘，然后加入EDTA終止反應。然后用 TBST沖洗板三次。兔多克隆抗磷酸酪氨酸的抗血清加到孔中，用含0.5% (w/v) BSA，0.025% (w/v)脫脂奶粉和100μM NaVO₄的TBST按1：1×10⁴稀釋，然后在37℃下溫育１小時。用TBST沖洗板三次，隨后加入HRP標記山羊抗兔抗血清二抗。板在37℃下溫育1小時，然后用TBST沖洗三次。加入2,22,2'-azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulfonate]底物后定量檢測磷酸化酪氨酸。

細胞實驗

細胞系

表達PDGFRβ或EGFR的HUVECs和NIH-3T3細胞

濃度

0.03-10μM，溶于DMSO，作為10mM儲存溶液

處理時間

1小時

方法

細胞按每35mm孔接種3×10⁵個細胞在含10% (v/v) FBS的DMEM培養(yǎng)基上，細胞生長融合，然后在含0.1%血清的DMEM培養(yǎng)基上處理2小時，然后進行藥物處理。HUVECs按每10cm板接種2×10⁶個細胞在內皮細胞生長培養(yǎng)基上，細胞生長融合，然后在含0.5% FBS的內皮細胞疾病培養(yǎng)基上進行24小時，然后進行藥物處理。所有細胞和SU6668溫育1小時，然后用100ng/ml配體刺激10分鐘。進行Western blotting。

動物實驗

動物模型

攜帶A375、Colo205、H460、Calu-6、C6、SF763T和SKOV3TP5移植瘤的雌性BALB/c，nu/nu鼠

配制

溶于DMSO

劑量

75-200mg/kg

給藥方式

腹腔注射或口服飼喂，每天一次。

產品編號

產品名稱

包裝

SF5301-10mM

TSU-68 (VEGFR抑制劑)

10mM×0.2ml

SF5301-5mg

TSU-68 (VEGFR抑制劑)

5mg

SF5301-25mg

TSU-68 (VEGFR抑制劑)

25mg

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說明書

1份