??????碧云天生產(chǎn)的顯色法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)為您提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細胞或組織樣品，經(jīng)過生物素標記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學顯微鏡下觀察到凋亡細胞。
??????細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA?ladder?；蚪MDNA斷裂時，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal?Deoxynucleotidyl?Transferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結(jié)合，最后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞，從而可以通過普通光學顯微鏡檢測到凋亡的細胞，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP?Nick-End?Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。
??????本試劑盒有如下優(yōu)點。(1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色強，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有 DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。(2)特異性好：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。(3)快速：僅需約2-3個小時即可完成。(4)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。(5) 實測效果好：參考圖1。

??????圖1. 本試劑盒的檢測效果圖。A. HeLa細胞未處理或用DNase I室溫孵育10分鐘后的檢測效果圖。B. Hela細胞未處理或用10μM喜樹堿(Camptothecin)處理24小時后的檢測效果圖。圖中棕褐色為DAB染色陽性細胞。本圖中的染色實驗均在12孔板中進行。本圖僅作參考，不同的樣品不同的檢測條件，實際獲得的結(jié)果可能和上圖有較明顯的差別。

??????TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
??????極少數(shù)細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，同時檢測多個凋亡指標。
??????本試劑盒足夠檢測20個樣品。?
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，DAB顯色液A和DAB顯色液B需避光保存。
注意事項：
??????需自備用于洗滌細胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液(P0126)等適當?shù)姆馄?，用于固定?%多聚甲醛或向碧云天訂購免疫染色固定液(P0098)，同時需自備含0.3% Triton X-100的PBS或向碧云天訂購免疫染色強力通透液(P0097)。需自備過氧化氫。
??????如果用于石蠟切片的檢測，需自備蛋白酶K和二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天訂購。
??????DAB對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。