K599 Chemically Competent Cell 產(chǎn)品說明書
產(chǎn)品規(guī)格 (CAT#: LM1080)
K599 Competent Cell: 100μl/支
pCAMBIA2301(control vector, 10ng/μl) 10μl
保存條件(保質(zhì)期): -80℃(12個月)
K599感受態(tài)細胞基因型
Agrobacterium rhizogenes (strR ) pRi2659 (agropine type)
K599感受態(tài)細胞產(chǎn)品說明
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌,它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。K599發(fā)根農(nóng)桿菌(NCPPB2659)含有pRi2659農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(葫蘆科,豆科,茄科等),同時具有鏈霉素抗性。本公司生產(chǎn)的K599化學轉化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pCAMBIA2301質(zhì)粒(卡那霉素抗性)檢測,轉化效率>103 cfu/μg DNA。
K599感受態(tài)細胞常規(guī)操作方法
1.取-80℃保存的K599發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2. 每100μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉化效率較高,次使用前做預實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手快速、劇烈撥打管底混勻或用槍吹吸混勻,依次放于冰中靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 冰浴中拿出放室溫,加入700μl 無抗生素的TY液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2小時。
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 TY平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3 天
關鍵字: K599_Electro感受態(tài)細胞_基因_
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