化學(xué)名

N-[4-[2-(6,7-dimethoxy-3,4-dihydro-1H-isoquinolin-2-yl)ethyl]phenyl]-5-methoxy-9-oxo-10H-acridine-4-carboxamide

簡稱

TRAM-34

別名

Tram 34

中文名

N/A

化學(xué)式

C₂₂H₁₇ClN₂

分子量

344.84

CAS號

289905-88-0

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO4mg/ml warming; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.45ml DMSO，或者每3.45mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF9105-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

TRAM-34是一種有效的，選擇性的中電導(dǎo)Ca²⁺-activated K⁺ channel (IKCa1， KCa3.1)(鈣激活的K+通道)抑制劑，Kd為20nM，比作用于其他離子通道選擇性高200到1500倍，且不抑制細(xì)胞色素P450。

信號通路

Transmembrane Transporters

靶點(diǎn)

IKCa1 (KCa3.1)

－

－

－

－

IC50

20nM(Kd)

－

－

－

－

體外研究

與Clotrimazole不同，TRAM-34 選擇性抑制IKCa1而不會阻斷細(xì)胞色素P450酶(CYP3A4)。TRAM-34 有效抑制IKCa1轉(zhuǎn)染的COS-7細(xì)胞中克隆的IKCa1通道，也抑制人類T淋巴細(xì)胞和T84細(xì)胞中的IKCad電流，Kd分別為20nM、25nM和22nM，比Clotrimazole更有效，Kd分別為70nM、100nM和90nM。TRAM-34比其他離子通道，如Kv、BKCad、SKCad、Na⁺、CRAC和Cl-通道選擇性高200到1500倍。TRAM-34顯著抑制anti-CD3抗體或PKC激活劑PMA和鈣離子載體離子霉素誘導(dǎo)的人類T淋巴細(xì)胞激活，IC50分別為295-910nM和85-830nM。TRAM-34(5μM)不會抑制人類T淋巴細(xì)胞或一些細(xì)胞系的細(xì)胞活力。TRAM-34顯著抑制EGF誘導(dǎo)的IKCa1上調(diào)和EGF刺激的A7r5增殖，IC50為8nM。TRAM-34處理抑制人類子宮內(nèi)膜癌(EC)細(xì)胞增殖，且阻斷EC細(xì)胞周期，使其停在G0/G1期。TRAM-34(1-30μM)抑制IKCa1通道，導(dǎo)致LNCaP和PC-3前列腺癌(PCa)細(xì)胞增殖受抑制，而不會導(dǎo)致凋亡，這種作用存在劑量依賴性，涉及p21Cip1提高和細(xì)胞周期停滯在G1期。

體內(nèi)研究

TRAM-34按通道阻斷劑量(0.5mg/kg/day)500-1000倍處理小鼠7天，沒有毒性。TRAM-34每天按120mg/kg劑量處理球囊導(dǎo)管損傷(BCI)的大鼠模型，顯著降低內(nèi)膜增殖，降低~40%。與體外抑制EC細(xì)胞增殖的效果相一致，在體內(nèi)TRAM-34按30μM 處理減慢HEC-1-A腫瘤的進(jìn)展。

臨床實(shí)驗(yàn)

N/A

特征

TRAM-34具有與Clotrimazole相似的療效，但是缺乏其毒副作用。

酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

方法

克隆人類IKCa1，然后在COS-7細(xì)胞中表達(dá)。在膜片鉗技術(shù)的全細(xì)胞中研究細(xì)胞。保持電位為280mV。內(nèi)部移液管溶液含：145mM K⁺天冬氨酸，2mM MgCl₂，10mM Hepes，10mM K2EGTA和8.5mM CaCl₂ (1μM游離Ca²⁺)，pH 7.2，290-310 mOsm。為了降低COS-7細(xì)胞中氯離子通道的電流，使用Na⁺天冬氨酸Ringer作為外部溶液：160mM Na⁺天冬氨酸，4.5mM KCl，2mM CaCl₂，1mM MgCl₂，5mM Hepes，pH 7.4，290-310 mOsm。每隔10秒使用-120mV到40mV的200-ms電壓斜率誘導(dǎo)COS-7細(xì)胞中的IKCa電流，且-80mV時TRAM-34降低的電導(dǎo)斜率用來衡量通道受抑制情況。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞系

人類T淋巴細(xì)胞，Jurkat E6-1，MEL，C2F3，CHO，COS-7，L929，ngP，nlF和RBL-2H3

濃度

溶于DMSO，終濃度為~10μM

處理時間

48小時

方法

使用TRAM-34處理細(xì)胞48小時。48小時后通過抽吸(懸浮細(xì)胞)或胰蛋白酶消化(粘附細(xì)胞)收集細(xì)胞，離心，再懸浮在0.5ml含1μg/ml碘化丙啶(PI)的PBS中，使用FACScan流式細(xì)胞儀測定紅色熒光。每個樣品中分析10⁴個細(xì)胞，通過測定PI攝取而測定死亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。

動物實(shí)驗(yàn)

動物模型

Sprague-Dawley大鼠

配制

在花生油中制備

劑量

120mg/kg/day

給藥方式

皮下注射

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

SF9105-10mM

TRAM-34 (Potassium Channel抑制劑)

10mM×0.2ml

SF9105-5mg

TRAM-34 (Potassium Channel抑制劑)

5mg

SF9105-25mg

TRAM-34 (Potassium Channel抑制劑)

25mg

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說明書

1份