黃薈草提取物及其成分 wedelolactone 對(duì)破骨前增殖和分化的抑制作用。

黃草，也被稱為“Mo-Han-Lian”，在中國(guó)長(zhǎng)期以來一直被用于滋養(yǎng)腎臟，然后增強(qiáng)骨骼。越來越多的證據(jù)表明，黃道草提取物具有抗骨質(zhì)疏松作用。然而，有效的化合物和細(xì)胞作用方式仍不清楚。探討黃道乙酯提取物 （EAE） 及其成分 Wedelolactone 對(duì)破骨前 RAW264.7 細(xì)胞增殖和分化以及骨髓基質(zhì)細(xì)胞 （BMSC） 增殖的影響。
方法和結(jié)果：
通過 3-（4,5-二甲基-2-噻唑基）-2,5-二苯基-2-H-四唑溴化物 （MTT） 法檢測(cè) RAW264.7 和 BMSC 的增殖。用 30ng/ml 核因子-κ B 配體受體激活劑 （RANKL） 和不同濃度的 EAE、韋地洛內(nèi)酯或阿侖膦酸鹽處理細(xì)胞后，使用對(duì)硝基苯基磷酸鈉 （pNPP） 測(cè)定細(xì)胞的抗酒石酸酸性磷酸酶 （TRAP） 活性。使用 TRAP 染色試劑盒觀察多核 TRAP 陽(yáng)性 RAW264.7 細(xì)胞的形成。 用高劑量 （20μg/ml 和 40μg/ml） 的 EAE 或 10μg/ml 的韋地洛內(nèi)酯處理 RAW264.7 細(xì)胞導(dǎo)致 RAW264.7 細(xì)胞增殖減少。低劑量的 EAE （5， 10μg/ml） 和韋地洛內(nèi)酯 （2.5μg/ml） 抑制 RANKL 誘導(dǎo)的 TRAP 活性 20.3%、37.9% 和 48.3%。Wedelolactone 的抑制作用比抗吸收藥物阿侖膦酸鹽更有效。形態(tài)學(xué)變化顯示 5μg/ml EAE 和 2.5μg/ml Wedelolactone 減少了多核破骨細(xì)胞樣細(xì)胞的數(shù)量。在高劑量下，EAE （20μg/ml） 和 Wedelolactone （10μg/ml） 抑制 BMSC 的生長(zhǎng)。
結(jié)論：
EAE 及其成分 Wedelolactone 在低劑量下抑制破骨細(xì)胞 RAW264.7 的增殖和分化，但在高劑量下，對(duì) BMSC 顯示出細(xì)胞毒作用。這些結(jié)果表明，EAE 和韋德洛酮可能是骨質(zhì)疏松癥的潛在替代療法。

Wedelolactone 通過人脂肪組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞中的 ERK 通路抑制脂肪生成。

Wedelolactone 是一種草藥，用于治療感染性休克、肝炎和毒液中毒。盡管在分化細(xì)胞和癌細(xì)胞中，Wedelolactone 已被確定為抗炎、生長(zhǎng)抑制和促凋亡，但 Wedelolactone 對(duì)干細(xì)胞分化的影響在很大程度上仍然未知。
方法和結(jié)果：
在這里，我們報(bào)道 Wedelo內(nèi)酯抑制人脂肪組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞 （hAMSC） 的成脂分化。Wedelolactone 減少脂滴的形成和脂肪生成相關(guān)蛋白的表達(dá)，例如 CCAAT 增強(qiáng)子結(jié)合蛋白 α （C/EBP-α）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ （PPAR-γ）、脂蛋白脂肪酶 （LPL） 和脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白 aP2 （aP2）。Wedelolactone 通過維持 ERK 活性介導(dǎo)這一過程。此外，用 PD98059 抑制 ERK 活性導(dǎo)致 Wedelolactone 介導(dǎo)的成脂分化抑制逆轉(zhuǎn)。
結(jié)論：
綜上所述，這些結(jié)果表明 Wedelolactone 通過 ERK 途徑抑制成脂分化，并表明 Wedelolactone 對(duì) hAMSC 中成脂分化具有新的抑制作用。

Wedelolactone 破壞 EZH2-EED 復(fù)合物的相互作用并抑制 PRC2 依賴性癌癥。

多梳抑制復(fù)合物 2 （PRC2） 負(fù)責(zé) H3K27 （H3K27me3） 的三甲基化，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展和/或維持成體組織特異性方面發(fā)揮作用。PRC2 在癌癥中的關(guān)鍵作用使其成為表觀遺傳學(xué)癌癥治療的治療靶點(diǎn)。然而，靶向 zeste 同源物 2 增強(qiáng)子 （EZH2） - 胚胎外胚層發(fā)育 （EED） 相互作用以禁用 PRC2 復(fù)合物的天然化合物很少報(bào)道。
方法和結(jié)果：
在這里，我們報(bào)告了可能破壞 EZH2-EED 相互作用的天然化合物的篩選和鑒定。其中一種化合物 Wedelolactone 以高親和力 （KD = 2.82 μM） 與 EED 結(jié)合，在體外阻斷 EZH2-EED 相互作用，誘導(dǎo) PRC2 核心成分的降解并調(diào)節(jié)檢測(cè)到的 PRC2 下游靶點(diǎn)和癌癥相關(guān)基因的表達(dá)。此外，一些 PRC2 依賴性癌細(xì)胞在用 Wedelolactone 處理后發(fā)生生長(zhǎng)停滯。
結(jié)論：
因此，靶向 EZH2-EED 相互作用的 Wedelolactone 及其衍生物可能是治療 PRC2 依賴性癌癥的候選者。

Wedelolactone 通過刺激雌激素受體信號(hào)傳導(dǎo)誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。

Wedelolactone 是一種植物香豆素，在體外和體內(nèi)被證明可作為乳腺癌和前列腺癌的抗癌劑，靶向多種細(xì)胞蛋白，包括雄激素受體、5-脂氧合酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶 IIα。它在 μM 濃度下對(duì)體外乳腺癌、前列腺癌、垂體癌和骨髓瘤癌細(xì)胞系具有細(xì)胞毒性。然而，在這項(xiàng)研究中，證明了 nM 劑量的 Wedelolactone 的新型生物活性。
方法和結(jié)果：
Wedelolactone 在 α 和 β 中充當(dāng)雌激素受體 （ER） 的激動(dòng)劑，如瞬時(shí)表達(dá) ERα 或 ERβ 的細(xì)胞中雌激素反應(yīng)元件 （ERE） 的反式激活以及該香豆素分子對(duì)接到 ERα 和 ERβ 的配體結(jié)合口袋中所證明的那樣。在乳腺癌細(xì)胞中，Wedelolactone 刺激雌激素受體陽(yáng)性細(xì)胞的生長(zhǎng)、雌激素反應(yīng)基因的表達(dá)并激活快速非基因組雌激素信號(hào)傳導(dǎo)。所有這些作用都可以通過用純 ER 拮抗劑 ICI 182,780 預(yù)處理來抑制，并且在 ER 陰性乳腺癌細(xì)胞中未觀察到它們。
結(jié)論：
我們得出結(jié)論，Wedelolactone 通過刺激 ER 基因組和非基因組信號(hào)通路在乳腺癌細(xì)胞中充當(dāng)植物雌激素。