目的: 評(píng)價(jià)蕓香堿對(duì)血管緊張素 II (Ang II) 誘導(dǎo)的培養(yǎng)大鼠血管平滑肌細(xì)胞 (VSMC) 增殖的影響和可能的機(jī)制。 方法: 為了檢查蕓香堿抗增殖作用所涉及的機(jī)制,測(cè)定了一氧化氮 (NO) 水平和 NO 合成酶 (NOS) 活性。實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng) (RT-PCR) 測(cè)定 VSMC 增殖相關(guān)基因的表達(dá),包括內(nèi)皮一氧化氮合酶 (eNOS) 和 c-myc 高血壓相關(guān)基因-1 (HRG-1)。 結(jié)果: 蕓香堿 (0.3-3.0 μmol/L) 抑制 Ang II 誘導(dǎo)的 VSMC 增殖,在 3.0 μmol/L 時(shí)效果最好。Rutaecarpine 拮抗 Ang II 誘導(dǎo)的細(xì)胞 NO 含量和 NOS 活性降低 (P <0.05)。Ang II 給藥抑制 eNOS 和 HRG-1 的表達(dá),同時(shí)增加 c-myc 的表達(dá) (P <0.05)。3.0 μmol/L 蕓香堿減輕了所有這些影響 (P <0.05)。 結(jié)論: 蕓香堿對(duì) Ang II 誘導(dǎo)的大鼠 VSMC 增殖有效,這種效果至少部分是由于 NO 的產(chǎn)生和 VMSC 增殖相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)節(jié)。
蕓香堿、吳茱萸堿和脫氫吳菖蒲堿是從傳統(tǒng)中藥 Evodia rutaecarpa 中分離的喹唑啉啉生物堿。使用小鼠和人肝微粒體研究了這些生物堿對(duì)細(xì)胞色素 P450 (P450) 催化的氧化的體外影響。方法和結(jié)果:在這些生物堿中,蕓香平對(duì) CYP1A 催化的 7-甲氧基試鹵靈 O-脫甲基化 (MROD) 和 7-乙氧基試鹵靈 O-脫乙基化 (EROD) 活性表現(xiàn)出最有效和選擇性的抑制作用。EROD 與 MROD 的 IC(50) 比率為 6。對(duì)于 MROD 活性,Rutaecarpine 是一種非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,K(i) 值為 39 +/- 2 nM。相比之下,蕓香堿對(duì)苯并[a]芘羥基化 (AHH) 、苯胺羥基化和硝苯地平氧化 (NFO) 活性沒(méi)有影響。在人肝微粒體中,1 μM 蕓香堿分別導(dǎo)致 EROD、MROD 和非那西丁 O-脫乙基化活性降低 98% 、 91% 和 77%。相比之下,在 1 μM 蕓香平存在下觀察到對(duì) AHH、甲苯磺丁脲羥基化、氯唑沙宗羥化和 NFO 活性的抑制低于 15%。為了了解抑制 CYP1A1 和 CYP1A2 的選擇性,使用 3-甲基膽蒽 (3-MC) 處理的小鼠的肝臟微粒體和表達(dá)雙順?lè)醋尤?CYP1A1 和 CYP1A2 的大腸桿菌膜研究了蕓香堿的抑制作用。與 CYP1A2 抑制劑呋喃堿類似,蕓香堿優(yōu)先抑制 MROD 而不是 EROD,并且對(duì) 3-MC 處理的小鼠肝微粒體中的 AHH 沒(méi)有影響。對(duì)于雙順?lè)醋尤?P450,蘆蕓香堿對(duì) CYP1A1 的 EROD 活性的 IC(50) 值比 CYP1A2 高 15 倍。結(jié)論:這些結(jié)果表明,Rutaecarpine 是小鼠和人肝微粒體中 CYP1A2 的有效抑制劑。
我們已經(jīng)檢查了低血壓作用和細(xì)胞內(nèi) Ca++ 調(diào)節(jié)的機(jī)制,這是蕓香堿 (Rut) 誘導(dǎo)的血管舒張的基礎(chǔ)。靜脈注射 在麻醉的 Sprague-Dawley 大鼠中推注 Rut 產(chǎn)生了劑量依賴性降壓作用。方法和結(jié)果:在離體大鼠主動(dòng)脈環(huán)中,Rut (0.1-3 μ M) 分別抑制去甲腎上腺素和葉腎上腺素誘導(dǎo)的收縮的階段和強(qiáng)直反應(yīng),主要通過(guò)內(nèi)皮依賴性機(jī)制。然而,Rut (3 μM) 的血管舒張作用在裸露的主動(dòng)脈中持續(xù)存在,盡管程度遠(yuǎn)小于完整組織。通過(guò)呋喃-2/AM(1-[2-(5-羧基噁唑-2-基)-6-氨基苯并呋喃-5-氧]-2-(2'-氨基-5'-甲基苯氧基)-乙烷-N,N,N,N-四乙酸五乙酰氧基甲酯)方法測(cè)定,Rut (10 μM),在細(xì)胞外 Ca++存在下,抑制 KCI 誘導(dǎo)的培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞 (VSMC) 細(xì)胞內(nèi) Ca++ 濃度 ([Ca++]i) 的增加。Rut (10 μM) 還減弱了去甲腎上腺素誘導(dǎo)的 VSMC 中 [Ca++]i 的峰值上升,置于無(wú) Ca++ 的溶液中。另一方面,在細(xì)胞外 Ca++ 存在下,Rut (1 和 10 μM) 增加了培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞 (EC) 的 [Ca++]i 水平。結(jié)論:總之,Rut 直接作用于 VSMC 和 EC。在 VSMC 中,它通過(guò)抑制 Ca++ 內(nèi)流和 Ca++ 從細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存中釋放來(lái)減少 [Ca++]i。在 EC 中,Rut 通過(guò)增加 Ca++ 內(nèi)流來(lái)增強(qiáng) EC [Ca++]i,可能導(dǎo)致一氧化氮釋放。VSMC 和 EC 中 Ca++ 的反常調(diào)節(jié)同時(shí)起作用導(dǎo)致血管舒張,這可能至少部分解釋低血壓作用。這是本研究最重要和獨(dú)特的特點(diǎn)。
我們之前已經(jīng)報(bào)道過(guò),中藥 Rutaecarpine (Rut) 在苯酚誘導(dǎo)的雙腎、單夾高血壓大鼠中產(chǎn)生了持續(xù)的降壓作用。本研究的目的是確定 Rut 是否可以對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠 (SHR) 發(fā)揮抗高血壓和抗血小板作用及其潛在機(jī)制。方法和結(jié)果:在體內(nèi),給予 SHR Rut,監(jiān)測(cè)血壓。采集血液用于測(cè)量降鈣素基因相關(guān)肽 (CGRP) 、組織因子 (TF) 濃度和活性以及血小板聚集,并保存背根神經(jīng)節(jié)用于檢測(cè) CGRP 表達(dá)。在體外,測(cè)量了 Rut 和 CGRP 對(duì)血小板聚集的影響,并測(cè)定了 CGRP 對(duì)血小板衍生的 TF 釋放的影響。Rut 在 SHR 中發(fā)揮持續(xù)的降壓作用,同時(shí)增加 CGRP 的合成和釋放。Rut 處理還顯示出對(duì)血小板聚集的抑制作用,伴隨著血漿中 TF 活性和 TF 抗原水平的降低。體外研究表明,在胸主動(dòng)脈存在下,Rut 對(duì)血小板聚集有抑制作用,其被辣椒西平或香草素受體或 CGRP 受體的拮抗劑 CGRP (8-37) 消除。外源性 CGRP 能夠抑制血小板聚集和血小板衍生的 TF 的釋放,這些被 CGRP 消除 (8-37)。結(jié)論:結(jié)果表明,Rut 通過(guò)刺激 SHR 中 CGRP 的合成和釋放同時(shí)發(fā)揮抗高血壓和抗血小板作用,CGRP 介導(dǎo)的抗血小板作用與抑制血小板衍生的 TF 的釋放有關(guān)。
蕓香堿是從 Evodia rutaecarpa 中分離的主要喹唑啉生物堿。據(jù)報(bào)道,它具有廣泛的藥理活性,例如血管舒張、抗血栓形成和抗炎。方法和結(jié)果:在本研究中,確定了 Rutaecarpine 對(duì)雌性 BALB/c 小鼠免疫功能的不利影響。通過(guò)轉(zhuǎn)氨酶的血清活性測(cè)量,蕓香堿對(duì)小鼠的肝毒性參數(shù)沒(méi)有影響。同時(shí),當(dāng)小鼠靜脈注射 10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg 或 80 cmg/kg 時(shí),蕓香堿顯著降低抗體形成細(xì)胞的數(shù)量,并以劑量依賴性方式導(dǎo)致脾臟重量減輕。此外,服用 Rutaecarpine 的小鼠表現(xiàn)出脾細(xì)胞數(shù)量減少,脾臟中總 T 細(xì)胞、CD4 (+) 細(xì)胞、CD8 (+) 細(xì)胞和 B 細(xì)胞數(shù)量減少。Rutaecarpine 處理顯著抑制了 IL-2 、 干擾素-γ 和 IL-10 mRNA 的表達(dá)。小鼠服用蕓香堿后 CD4 (+) IL-2 (+) 細(xì)胞的數(shù)量顯著減少。此外,Rutaecarpine 以劑量依賴性方式導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯在 G(0)+G(1) 期。蕓香堿劑量依賴性地引起肝細(xì)胞色素 P450 (CYP) 1A、2B 和 2E1 活性的顯著誘導(dǎo)。在脾淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)中,蕓香堿通過(guò)離體 LPS 和 Con A 抑制增殖,而對(duì)體外增殖沒(méi)有影響。結(jié)論:這些結(jié)果表明,單次推注靜脈注射 20mg/kg 的蕓香堿可能引起免疫抑制作用,并且蕓香堿誘導(dǎo)的免疫抑制可能至少部分是通過(guò)抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生和細(xì)胞周期停滯在 G(0)+G(1) 期介導(dǎo)的,并且可能是由與代謝激活相關(guān)的機(jī)制引起的。
我們研究了一類新型 COX-2 抑制劑蕓香堿對(duì)骨髓來(lái)源的肥大細(xì)胞 (BMMC) 中 PGD2 和 COX-2 轉(zhuǎn)染的 HEK293 細(xì)胞中 PGE2 產(chǎn)生的影響。在雄性 Splague-Dawley (SD) 大鼠中由 lambda-卡拉膠誘導(dǎo)炎癥。方法和結(jié)果:從蕓香蕓苓果實(shí)中分離出蕓香堿 (8,13-二氫吲哚[2',3':3,4]吡啶[2,1-b]喹唑啉-5(7H)-one)。BMMC 用 WEHI-3 條件培養(yǎng)基培養(yǎng)。c-Kit 配體和 IL-10 是通過(guò)它們?cè)跅U狀病毒中的表達(dá)獲得的。 PGD2 和 PGE2 的產(chǎn)生由他們的檢測(cè)試劑盒測(cè)定。在 KL 、 LPS 和 IL-10 存在下,通過(guò) BMMC 測(cè)定 COX-1 和 COX-2 蛋白和 mRNA 表達(dá)。腹膜內(nèi)給予溶于 0.1% 羧甲基纖維素中的蕓香平和吲哚美辛,1 小時(shí)后,將 lambda-卡拉膠溶液注射到大鼠的右后爪。在 lambda-角叉菜膠注射后 5 小時(shí)使用體積描記器測(cè)量爪體積。蕓香堿以濃度依賴性方式抑制 BMMC 中 PGD2 生成的 COX-2 和 COX-1 依賴期,IC50 分別為 0.28 μM 和 8.7 μM。它以劑量依賴性方式抑制 COX-2 轉(zhuǎn)染的 HEK293 細(xì)胞以劑量依賴性方式抑制外源花生四烯酸向 PGE2 的轉(zhuǎn)化。然而,蕓香堿既不抑制 PLA2 和 COX-1 活性,也不抑制 COX-2 蛋白和 mRNA 的表達(dá),在 BMMC 中濃度高達(dá) 30 μM,表明蕓香堿直接抑制了 COX-2 活性。此外,Rutaecarpine 通過(guò)腹膜內(nèi)給藥對(duì)大鼠 lambda-carragenan 誘導(dǎo)的爪水腫顯示出體內(nèi)抗炎活性。結(jié)論:Evodia rutaecarpa 的抗炎活性至少部分歸因于抑制 COS-2。
由連接蛋白形成的間隙連接已被證明在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中起重要作用。據(jù)報(bào)道,蕓香堿抑制單核細(xì)胞遷移,這表明其具有抗動(dòng)脈粥樣硬化活性的潛力。 本研究評(píng)價(jià)了蕓香堿對(duì)內(nèi)皮功能障礙的影響,并側(cè)重于蕓香堿對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞連接蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)。方法和結(jié)果:通過(guò)將 HUVEC-12 暴露于 Ox-LDL (100mg/l) 24 h 誘導(dǎo)內(nèi)皮損傷,這降低了保護(hù)蛋白 Cx37 和 Cx40 的表達(dá),但誘導(dǎo)了 mRNA 和蛋白水平的致動(dòng)脈粥樣硬化 Cx43 表達(dá),伴隨著碘化丙啶通過(guò)間隙連接的擴(kuò)散受損。蕓香堿預(yù)處理有效恢復(fù)了 Cx37 和 Cx40 的表達(dá),但抑制了 Cx43 的表達(dá),從而改善了間隙連接通訊,顯著預(yù)防了內(nèi)皮功能障礙。因此,細(xì)胞活力和一氧化氮產(chǎn)生增加,乳酸脫氫酶產(chǎn)生減少,單核細(xì)胞粘附受到抑制。用辣椒西平預(yù)處理后,蕓香堿的這些保護(hù)作用顯著減弱,辣椒西平是瞬時(shí)受體電位香草酸亞型 1 (TRPV1) 的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑。結(jié)論:綜上所述,本研究首次報(bào)道蕓香堿在體外預(yù)防 Ox-LDL 誘導(dǎo)的內(nèi)皮損傷和間隙連接功能障礙,這與通過(guò) TRPV1 激活調(diào)節(jié)連接蛋白表達(dá)模式有關(guān)。這些結(jié)果表明,蕓香堿具有作為具有新機(jī)制的抗動(dòng)脈粥樣硬化劑的潛力。
基質(zhì)金屬蛋白酶 (MMP) 是因暴露于紫外線 A 而導(dǎo)致皮膚光老化的關(guān)鍵成分,似乎因紫外線 A 照射相關(guān)活性氧的產(chǎn)生而增加。方法和結(jié)果:在這項(xiàng)研究中,我們研究了合成的蕓香堿(也存在于蕓香中)對(duì)紫外線 A 誘導(dǎo)的明膠酶表達(dá)變化的影響:基質(zhì)金屬蛋白酶 (MMP)-2 和 MMP-9 使用 HaCaT 人角質(zhì)形成細(xì)胞作為模型細(xì)胞系統(tǒng)。紫外線 A 照射 HaCaT 細(xì)胞增加了 MMP-2 和 MMP-9 的凝膠溶解活性,而蕓香堿預(yù)處理則顯著抑制了這種活性。此外,蕓香堿顯著抑制紫外線 A 誘導(dǎo)的 MMP-2 和 MMP-9 蛋白和 mRNA 表達(dá)增強(qiáng)。Rutaecarpine 還抑制 H2O2 誘導(dǎo)的 MMP-2 和 MMP-9 表達(dá)增加。此外,蕓香堿降低了紫外線 A 誘導(dǎo)的活性氧生成增加。結(jié)論:綜上所述,這些結(jié)果表明,蕓香堿抑制紫外線 A 誘導(dǎo)的活性氧生成,導(dǎo)致 MMP-2 和 MMP-9 在人體皮膚細(xì)胞中的表達(dá)增強(qiáng)。 這些結(jié)果進(jìn)一步表明,ruetaecarpine 可能有助于預(yù)防紫外線 A 誘導(dǎo)的光老化。
現(xiàn)在已經(jīng)確定,炎癥在許多慢性代謝疾病的發(fā)展中起著重要作用,包括胰島素抵抗 (IR) 和 2 型糖尿病 (T2DM)。骨骼肌負(fù)責(zé)胰島素依賴性葡萄糖總攝取的 75%;因此,骨骼肌 IR 被認(rèn)為是全身性 IR 發(fā)展的主要缺陷。 我們先前的研究表明,蕓香堿 (Rut) 有益于 T2DM 大鼠的血脂分析,減輕炎癥,并改善腎臟、肝臟、胰腺病理狀況。然而,尚未研究 Rut 對(duì) IR 骨骼肌細(xì)胞發(fā)育中炎性細(xì)胞因子的影響。因此,我們的目的是研究 Rut 對(duì)胰島素抵抗原代骨骼肌細(xì)胞 (IR-PSMC) 中炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介體 (IL)-1 、 IL-6 和腫瘤壞死因子 (TNF)-α 的影響。方法和結(jié)果:從 5 例新生 SD 大鼠中制備骨骼肌細(xì)胞原代培養(yǎng)物,通過(guò)細(xì)胞形態(tài)鑒定原代大鼠骨骼肌細(xì)胞,通過(guò) MTT 法鑒定茹鐵蕓香堿對(duì)細(xì)胞增殖的影響。棕櫚酸 (PA) 誘導(dǎo) IR-PSMC 細(xì)胞,葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化物酶 (GOD-POD) 法測(cè)定葡萄糖濃度。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 (ELISA) 試劑盒檢測(cè) Rut 對(duì) IR-PSMC 細(xì)胞炎性細(xì)胞因子 IL-1 、 IL-6 和 TNF-α 的影響。結(jié)果顯示,新生大鼠原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng) 2-4 d,平行排列規(guī)律,培養(yǎng) 7 d,細(xì)胞融合并形成肌管。結(jié)果表明,濃度為 0-180 的 Rut。0 μmol x L(-1) 對(duì)培養(yǎng)的原代骨骼肌細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞毒性作用。然而,暴露于 0.6 mmol x L(-1) PA 24 小時(shí)后,原代骨骼肌細(xì)胞能夠誘導(dǎo)胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。獲得的結(jié)果表明,與 Rut 孵育 24 小時(shí)時(shí),培養(yǎng)的 IR-PSMC 細(xì)胞產(chǎn)生 IL-1 、 IL-6 和 TNF-α 顯著減少 (P < 0.05 至 P < 0.001) 從 20 至 180.0 μmol x L(-1)。與 IR-PSMC 對(duì)照組相比,Rut 處理組的 IL-1 、 IL-6 和 TNF-α 呈劑量依賴性降低。結(jié)論:我們的結(jié)果表明,Rut 可能通過(guò)抑制 IR-PSMC 細(xì)胞中的炎性細(xì)胞因子促進(jìn)葡萄糖消耗和改善胰島素抵抗。
先前的研究表明,降鈣素基因相關(guān)肽 (CGRP) 保護(hù)胃粘膜免受乙酰水楊酸 (ASA) 誘導(dǎo)的損傷,并且蕓香堿激活香草素受體以誘發(fā) CGRP 釋放。方法和結(jié)果:在本研究中,我們檢查了蕓香堿對(duì)胃粘膜損傷的保護(hù)作用,并探討了蕓香堿的保護(hù)作用是否與通過(guò)激活大鼠香草素受體刺激內(nèi)源性 CGRP 釋放有關(guān)。在 ASA 誘導(dǎo)的潰瘍模型中,測(cè)定胃粘膜潰瘍指數(shù)、胃液 pH 值和血漿 CGRP 濃度。ASA 顯著增加胃黏膜潰瘍指數(shù)和 H+ 通過(guò)黏膜的反向擴(kuò)散。劑量為 100 或 300 μg/kg (iv) 和 300 或 600 μg/kg (胃內(nèi),ig.) 的蕓香堿降低了潰瘍指數(shù)和 H+ 的反向擴(kuò)散,這通過(guò)用辣椒素 (50 mg/kg, sc.) 或辣椒西平 (3 mg/kg, iv) 預(yù)處理而消除,一種競(jìng)爭(zhēng)性香草素受體拮抗劑。Rutaecarpine 顯著增加了 CGRP 的血漿濃度,這也被辣椒西平消除了。在應(yīng)激誘導(dǎo)的潰瘍模型中,蕓香平減少了胃粘膜損傷,這被辣椒西平 (5 mg/kg, ip) 消除。結(jié)論:這些結(jié)果表明,蕓香堿保護(hù)胃粘膜免受 ASA 和應(yīng)激誘導(dǎo)的損傷,蕓香堿的胃保護(hù)作用與通過(guò)激活香草素受體刺激內(nèi)源性 CGRP 釋放有關(guān)。
84-26-4可能是一個(gè)化學(xué)物質(zhì)的CAS編號(hào),對(duì)應(yīng)的化學(xué)物質(zhì)是吳茱萸次堿。以下是對(duì)吳茱萸次堿的詳細(xì)介紹:
英文名稱:Rutaecarpine
CAS編號(hào):84-26-4
分子式:C18H13N3O
分子量:287.32
外觀:白色結(jié)晶
純度:市面上產(chǎn)品多為≥98%
熔點(diǎn):259.5~260℃
溶解性:溶于丙酮,微溶于乙醇、乙醚、氯仿,幾乎不溶于水、石油醚、苯。
化學(xué)性質(zhì):具有特定的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì),可作為生物堿類化合物進(jìn)行研究。
用途:
用于含量測(cè)定、鑒定以及藥理實(shí)驗(yàn)等。
作為延遲整流K+通道阻滯劑,在藥理學(xué)研究中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
提取來(lái)源:主要來(lái)源于蕓香科植物吳茱萸(Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth.)的干燥將近成熟果實(shí)。
制備過(guò)程:通常通過(guò)特定的提取和純化工藝從吳茱萸中獲得,制備過(guò)程中可能涉及酸堿調(diào)整、結(jié)晶、硅膠柱層析等技術(shù)。
儲(chǔ)存條件:應(yīng)在2~8℃或4℃冷藏、密封、避光保存,以確保其穩(wěn)定性和純度。
有效期:根據(jù)生產(chǎn)廠商和儲(chǔ)存條件的不同,有效期可能有所不同,但通常為1~3年。
標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照品:吳茱萸次堿可作為標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌酚糜谒幤?、生物制品等的檢驗(yàn)和校準(zhǔn)。在使用前應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確認(rèn)無(wú)誤后方可使用。
注意事項(xiàng):對(duì)于已開(kāi)封的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌?,?yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行管理和使用,避免與其他物質(zhì)混淆或受到污染。
綜上所述,84-26-4代表的化學(xué)物質(zhì)吳茱萸次堿在化學(xué)、藥理學(xué)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值和研究意義。如需更多信息,建議查閱相關(guān)文獻(xiàn)或咨詢專業(yè)人士。
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王玲