日勾維多細菌源菌 百歐博偉生物 微生物菌種

日勾維多細菌源菌是Pluralibacter屬的微生物，原產地為法國。主要用途為分類；研究，具體用途為分類學研究、抗菌防腐劑試驗研究。

一、菌種簡介

平臺編號：Bio-85070

規(guī)格：凍干粉

拉丁屬名：Pluralibacter Gergoviae

中文名稱：日勾維多細菌源菌

拉丁名稱：Pluralibacter gergoviae

其它保藏中心編號：=DSM 9245=ATCC 33028=CDC 604-77=CIP 76.01=JCM 1234=LMG 5739=NCTC 11434

來源歷史：←DSMZ←CIP

收藏時間：2016/6/15

原始編號：CDC 604-77

原產國：法國

模式菌株：模式菌株

主要用途：分類；研究

特征特性：雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基中44.5℃培養(yǎng)不生長。在伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基上的菌落白色至淺粉色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤。16S rRNA 基因序列號：AB004748；rpoB 基因序列號：JX425263；infB 基因序列號：JX425133；gyrB 基因序列號：JX425004；atpD 基因序列號：JX424874。

具體用途：分類學研究、抗菌防腐劑試驗研究。

生物危害程度：三類

培養(yǎng)基編號：CM0847

培養(yǎng)基名稱：胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA）(CAIQ0701)

培養(yǎng)基成分：胰蛋白胨 15.0g，大豆胨 5.0g，氯化鈉 5.0g，瓊脂 13.0 g，蒸餾水 1.0L，pH7.3±0.2。

培養(yǎng)溫度：30℃

需氧類型：好氧

分離基物：小便

采集地：法國克萊蒙費朗

保存方法：-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享

提供形式：凍干物

用途：分類學研究、抗菌防腐劑試驗研究。

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）

二、培養(yǎng)基

* 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（NA）

* 胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）

* LB 培養(yǎng)基（以上三款培養(yǎng)基任選一種即可）

三、培養(yǎng)方法

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養(yǎng)成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子，如赤霉素產生菌或產孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

四、實驗內容

1、稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查

2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物

3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查

4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌

五、使用范圍

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚，釀酒酵母菌組成成分精確，重復性強，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)細菌。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質的需要。

六、注意事項

1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支平板或者斜面，若接種液體培養(yǎng)基，則試管液體不超過 5ml 為宜）；

2）經過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間；若您收到的是已復蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據需要轉接培養(yǎng)如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；

3）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

4）菌種操作應在無菌條件下進行；轉種完畢，應經滅菌再做丟棄處理；

5）應根據菌種狀況及時轉接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；

6）菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降或不活，請在收到后 2 個月內和微生物菌種查詢網聯系，逾期不予受理；

7）打管操作需由專業(yè)微生物技術人員在相應的防護設備中進行，生物危害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作，打管時凍干管應遠離面部，保護眼睛。

8）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。

9）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數的增加，細菌的活力會逐漸下降。

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