熱噬淀粉芽孢桿菌 百歐博偉生物 微生物菌種

熱噬淀粉芽孢桿菌是Bacillus屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。主要用途為分類；研究；分析檢測，具體用途為巖心模擬提高石油采收率。

一、菌種簡介

平臺編號：Bio-56413

提供形式：凍干物

拉丁屬名：Bacillus Thermoamylovorans

中文名稱：熱噬淀粉芽孢桿菌

屬名：Bacillus

種名加詞：thermoamylovorans

來源歷史：←輕工業(yè)部發(fā)酵工業(yè)科學研究所戴家琨分離

收藏時間：1982.00.00

原始編號：6210

資源歸類編碼：15131311101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；分析檢測

具體用途：殺菌試驗菌。  

生物危害程度：四類

致病對象：無

分離基物：豬肝罐頭

采集地：上海益民一廠

培養(yǎng)基：牛肉膏 10.0g，蛋白胨 10.0g，葡萄糖 10.0g，NaCl 5.0g，K2HPO4 2.5g，蒸餾水 1.0L，1.6%溴甲酚紫 1.0ml，瓊脂 15.0g，pH7.0。

培養(yǎng)溫度：50-55℃

資源保藏類型：培養(yǎng)物

保存方法：真空冷凍干燥法

實物狀態(tài)：有實物

共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享

源數(shù)據(jù)主鍵：10143

用途：研究；分析檢測；殺菌試驗菌。

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）

二、形態(tài)特征

嗜熱淀粉芽孢桿菌NK 2.us-8的菌體細胞為細長桿狀，在顯微鏡下觀察菌體的大小為0.3～0.5μm×2.4～4.7μm。菌體細胞呈細長桿狀，排列不整齊。革蘭氏染色呈陰性。在固體培養(yǎng)基表面，菌體形成半透明的乳白色菌落，菌落光滑，邊緣整齊。

三、菌種的培養(yǎng)

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純 菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的 菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在 上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些 菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

四、保藏方法

1、傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2、液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。

3、載體保藏法

是將微生物吸附在適當?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當廣泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5、冷凍保藏法

可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

6、冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對水和細胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細胞成分的構(gòu)型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

五、注意事項

1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支斜面或平板；或直接接種液體培養(yǎng)基，以不超過 5ml 為宜）；

2）經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時可能會延遲生長，這時需較長的培養(yǎng)時間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實驗，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；二次接種量要多，固體斜面培養(yǎng)基水分要少才能讓菌體長得比較明顯，液體培養(yǎng)要靜止培養(yǎng)；

3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

4）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；

5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；

6）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系；

7）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請在收到菌種后 2 個月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；

8）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護設(shè)備中進行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時凍干管應(yīng)遠離面部，保護眼睛；

9）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作；

10）甘油管使用：使用本甘油菌時可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細菌的活力會逐漸下降。

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