產(chǎn)品介紹:
傳統(tǒng)的microRNA提取試劑盒均是采用異硫氰酸胍/苯酚/氯仿(TRIzol法)加高濃度乙醇硅膠膜吸附小片段microRNA的原理方法制成,但是復(fù)雜的植物品類如棉花、葡萄、胡楊、冬青、月季、石斛、單參、水稻種子、人參、玉米胚芽等大量樣品用TRIzol的原理甚至無法提取符合要求的總RNA,更不用說microRNA。因此包括Qiagen,Invitrogen等世界有名公司采用Trizol法原理的microRNA提取試劑盒面臨復(fù)雜植物樣品時束手無策,產(chǎn)品線中干脆就沒有復(fù)雜植物microRNA提取試劑盒。用戶無奈只好用傳統(tǒng)方法,或者TRIzol法提取,用異丙醇/乙醇沉淀方法來提取microRNA,雖然也能提取到部分microRNA,但是沉淀法損失巨大或者和雜質(zhì)共沉淀,影響實驗結(jié)果,在國際刊物投稿時常常面臨質(zhì)疑,甚至論文被撤銷。而本試劑盒在公司全球數(shù)百種復(fù)雜植物提取的經(jīng)驗基礎(chǔ)上(發(fā)表文章130多篇,包括人參、雪蓮、棉花、胡楊、冬青等各種復(fù)雜植物,并獲得發(fā)明專利授權(quán)),創(chuàng)新性的采用了不用苯酚,氯仿的技術(shù)路線全球首家解決該問題,可以提取絕大多數(shù)復(fù)雜植物如棉花、楊樹、冬青、月季、丹參等植物microRNA,當(dāng)然本試劑盒也適用于擬南芥、水稻、小麥、煙草、水稻等各種簡單樣品。 獨特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶,植物RNA助提劑PLANTaid幫助結(jié)合多糖多酚并通過離心去除,然后裂解混合物通過基因組DNA清除柱,基因組DNA被清除而RNA(包括microRNA)被選擇性濾過。濾過的RNA用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜, 再通過一系列特殊漂洗液快速的漂洗-離心的步驟,將細(xì)胞代謝物,蛋白等雜質(zhì)去除, 最后低鹽的RNase free H20將純凈RNA(包括microRNA)從硅基質(zhì)膜上洗脫。 采用分提取操作步驟也可單獨純化富集后的microRNA組分和總RNA(>200 nt)從而得到分離富集的microRNA和RNA。
產(chǎn)品特點:
1. 完全不使用有毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。2. 快速,簡捷,單個樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。3. 獨有的植物RNA助提劑可以有效結(jié)合多糖多酚,提高清除效果。4. 多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9~2.0,可用于RT-PCR,Northern-blot和各種實驗。使用該產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:http://www.aidlab.cn/news-show.asp?id=171
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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