冬凌草甲素對T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病的抗白血病作用[Pubmed：25571712]

四川大雪雪包包薛班。2014年11月;45(6):903-7.

探討冬凌草甲素對T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系CEM的抗白血病作用。
方法與結(jié)果：
人T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系CEM體外培養(yǎng)。使用改良的 MTT 測定法檢查冬凌草甲素對 CEM 細(xì)胞的 50% 抑制濃度 （IC50）。使用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化。通過流式細(xì)胞術(shù)分析評估藥物治療后CEM細(xì)胞凋亡的百分比。Western blot檢測AKT/mTOR、RAF/MEK/ERK、STAT5信號通路的活性水平以及Bcl-2和BAX的表達(dá)水平。冬凌草甲素對CEM細(xì)胞的生長呈時(shí)間和劑量依賴性，處理72 h后冬凌草甲素的ICs0為（7. 37± 1. 99） μmol/L。用冬凌草甲素處理的CEM細(xì)胞的細(xì)胞膜變得不鋒利，其中一些已經(jīng)崩解。冬凌草甲素誘導(dǎo)CEM細(xì)胞凋亡和0、5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素處理24 h后細(xì)胞凋亡率百分比分別為（4. 8±2. 11）%、（19.03±12.54）%、（40.27± 3.31）/和（57. 23 ± 6. 69）%。冬凌草甲素抑制mTOR，P70S6,4EBP1，RAF的激活。ERK和STAT5信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白在CEM細(xì)胞中被組成型激活，但冬凌草甲素對AKT激酶沒有抑制作用。冬凌草甲素下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2水平，上調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)。
結(jié)論：
冬凌草甲通過抑制mTOR/P70/4EBP1、RAF/ERK和STATS信號通路的激活，下調(diào)Bel-2的表達(dá)和上調(diào)BAX的表達(dá)，在CEM細(xì)胞中發(fā)揮抗白血病作用。

冬凌草甲素抗胰腺癌作用的實(shí)驗(yàn)研究.[Pubmed：25566662]

鐘耀才 2014年7月;37(7):1230-3.

研究冬凌草甲素在人胰腺癌細(xì)胞PANC-1中的凋亡作用，并探討其潛在機(jī)制。
方法和結(jié)果：
采用MTT法測定細(xì)胞活力。Hoechst 33342染色后通過共聚焦激光掃描顯微鏡測定細(xì)胞凋亡，PI染色后通過流式細(xì)胞術(shù)分析。Western blot分析JNK和p38 MAPK信號通路蛋白的調(diào)控。 用冬凌草甲素處理24小時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞活力以劑量依賴性方式顯著降低。IC50值為49.80 μmol/L，持續(xù)24 h。用 50 μmol/L 和 80 μmol/L 冬凌草甲素處理 24 小時(shí)后，用共聚焦激光掃描顯微鏡觀察到典型的凋亡細(xì)胞核改變，流式細(xì)胞術(shù)分析增加了 PANC-1 細(xì)胞的凋亡率。用80 μmol/L冬凌草甲素處理可下調(diào)JNK，p38蛋白的表達(dá)，增加p-JNK，p-p38的表達(dá)。此外，80 μmol/L冬凌草甲素處理降低了細(xì)胞凋亡途徑中下游蛋白Caspase-9、Caspase-3和PARP的表達(dá)，并激活了Caspase-9的裂解。
結(jié)論：
冬凌草甲素可通過JNK和p38 MAPK通路蛋白誘導(dǎo)PANC-1細(xì)胞凋亡。

冬凌草甲素通過細(xì)胞凋亡抑制 BxPC-3 細(xì)胞生長。[Pubmed：25651847]

Acta Biochim Biophys Sin（上海）。2015年3月;47(3):164-73.

冬凌草甲素是一種從傳統(tǒng)中草藥Rabdosia rubescens中提取的ent-kaurene二萜類化合物，具有多種生物學(xué)和藥學(xué)功能，已在臨床上使用多年。雖然冬凌草甲素的抗腫瘤功能已被眾多證據(jù)證實(shí)，但其抗癌機(jī)制尚未得到充分證明。
方法與結(jié)果：
本研究以胰腺癌細(xì)胞系BxPC-3為模型，通過檢驗(yàn)其對細(xì)胞活力的影響，研究冬凌草甲素可能的抗癌機(jī)制。結(jié)果表明，冬凌草甲素以時(shí)間和劑量依賴性方式影響細(xì)胞活力。暴露于不同濃度的冬凌草甲素后，與未處理的細(xì)胞相比，BxPC-3細(xì)胞的生長速率和細(xì)胞周期停滯顯著降低，表明其對增殖抑制的作用。Western blot分析的詳細(xì)信號通路分析顯示，低劑量冬凌草甲素處理通過上調(diào)p53和下調(diào)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶1（CDK1）抑制BxPC-3細(xì)胞增殖，導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯在G2/M期。高劑量冬凌草甲素不僅在G2/M期阻滯BxPC-3細(xì)胞，而且在S期誘導(dǎo)細(xì)胞積累，可能是通過γH2AX上調(diào)和DNA損傷。
結(jié)論：
此外，我們的結(jié)果表明，在冬凌草甲素處理后，用碘化丙啶對細(xì)胞亞群進(jìn)行染色。蛋白質(zhì)定量顯示，高劑量冬凌草甲素治療后，裂解聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）表達(dá)增加，尤其是長期暴露后。伴隨著 BxPC-3 細(xì)胞中失活 PARP 水平的增加，細(xì)胞凋亡引發(fā)劑 caspase-3 和 caspase-7 表達(dá)也顯著增加，表明 caspase 介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡導(dǎo)致細(xì)胞死亡。