艾普蒂生物多年致力于重組蛋白表達與制備研究。我們的科學(xué)家擁有豐富的酵母（Yeast）蛋白重組表達、發(fā)酵和純化經(jīng)驗，能夠快速為不同客戶定制蛋白酵母表達策略。
蛋白酵母表達系統(tǒng)兼具部分原核蛋白表達特征（培養(yǎng)條件簡單、生長速度快、表達水平高、操作簡便）和部分真核蛋白表達特征（蛋白翻譯后能進行正確加工、修飾，合理的空間折疊）。重組蛋白酵母表達系統(tǒng)的優(yōu)勢主要表現(xiàn)在以下幾個方面：重組蛋白既可以分泌形式又可以非分泌形式在酵母系統(tǒng)中表達，且能高水平表達，達到5g/L；外源蛋白基因可以以整合的方式插入到酵母染色體上，隨染色體復(fù)制而不會丟失；酵母具有真核生物的亞細胞結(jié)構(gòu)，具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻譯后修飾加工功能，適合活性蛋白表達；容易實現(xiàn)超高密度發(fā)酵，艾普蒂生物能同時為客戶提供多種規(guī)格的蛋白酵母發(fā)酵規(guī)模，如500L發(fā)酵罐，配合我們的蛋白純化平臺，能夠在較短周期內(nèi)獲得高質(zhì)量的重組蛋白產(chǎn)品。
蛋白酵母分泌表達步驟與周期
步驟 | 服務(wù)內(nèi)容 | 周期 |
酵母表達載體亞克隆 | *密碼子優(yōu)化，基因合成(或客戶提供質(zhì)粒模板：目的基因擴增) *將目標基因亞克隆到合適的表達質(zhì)粒上，可提供表達載體，如pPICZaA 、pGAPZaA、pPIC9K *拼接序列驗證：測序 *交付：正確構(gòu)建的重組表達質(zhì)粒，含重組質(zhì)粒的DH5α菌株及測序原始報告 | 1-2周 |
酵母表達菌株轉(zhuǎn)化 | *可提供表達菌株：X33，GS115，釀酒酵母等。 *擴增培養(yǎng)5-10個陽性克隆并進行重組蛋白誘導(dǎo)表達 *SDS-PAGE交付：陽性克隆菌株及表達篩選結(jié)果報告。 | 2周 |
酵母表達菌株篩選 | *檢測重組蛋白表達情況（適用于多拷貝數(shù)和高表達菌株） *交付：陽性克隆菌株及表達篩選結(jié)果報告。 | 2周 |
酵母表達菌株表達優(yōu)化 | 對挑選出來的單克隆菌株，優(yōu)化培養(yǎng)及誘導(dǎo)條件（培養(yǎng)基，菌體密度，甲醇濃度，誘導(dǎo)時間等），提高目標蛋白的表達量 | 2周 |
小規(guī)模蛋白表達及純化 | *1L發(fā)酵液通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。 *SDS-PAGE交付：重組蛋白0.02-3mg及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度>85%。 | 2-3周 |
大規(guī)模蛋白表達及純化 | 10L，30L，80L,130L,500L發(fā)酵規(guī)模 |
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增值服務(wù) | *通過HPLC，質(zhì)譜等方法詳細檢測目標蛋白的質(zhì)量。 *蛋白質(zhì)N端測序：PPSQ31（Edman降解法測序儀） | 1-2周
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服務(wù)優(yōu)勢
--密碼子優(yōu)化：包含稀有密碼子分析，蛋白親水性分析和跨膜結(jié)構(gòu)域的預(yù)測分析
--分泌蛋白表達，接近天然構(gòu)象的重組蛋白
--多種規(guī)模蛋白發(fā)酵模式：小規(guī)模（500ml、10L）和大規(guī)模（80L、130L、250L和500L發(fā)酵罐）
--高純度毫克級，克級重組蛋白；穩(wěn)定的批間一致性
--低內(nèi)毒素：LAL檢測法<0.1EU/ug
--完整的GMP文件支撐體系，保證實驗信息可追溯
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關(guān)鍵字： 重組蛋白酵母表達服務(wù);蛋白酵母;酵母表達;酵母表達服務(wù);蛋白酵母表達服務(wù);
湖北艾普蒂生物工程有限公司（簡稱：艾普蒂）由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術(shù)團隊和企業(yè)管理團隊組建而成，專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學(xué)品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長期聚焦于生命科學(xué)、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測等領(lǐng)域，專注于為生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。提供生命科學(xué) 試劑、供應(yīng)鏈服務(wù)等，為更多的生命科學(xué)科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細胞、組織、動物等水平的各種研究。
致力于成長為我國重要的生命科學(xué)試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的領(lǐng)導(dǎo)者、致力于成為中國大型的科研試劑產(chǎn)品供應(yīng)商之一。