參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：尖孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒植物病原
型號　:　　 EY00P505
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 結(jié)腸平滑肌細(xì)胞cDNAHCSMC cDNA無水碳酸鈉質(zhì)量規(guī)格：AR,≥99.8% carbonate anhydrous

NCL-H460細(xì)胞，非小細(xì)胞肺癌 肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞,HPAEC細(xì)胞 肝動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-果糖質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRD-Fructose

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)核黃素1酸鈉水合物質(zhì)量規(guī)格：核黃素73.0 ~79.0%Riboflavin 5'-monophosphate  salt hydrate

TNFRSF10A Others Human  TNFRSF10A / CD261 / APO2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴化乙錠溶液，10 mg/ml質(zhì)量規(guī)格：>98%,BREB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml

CL-0231TE-1(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2APMSF(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分,sigma A6664p-APMSF,

尖孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒植物病原高鈣血癥惡性因子（1-34）， 人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA檢測試劑盒Human5-hydroxyindolacetic,5-HIAAELISAKit 96T/48T  ELISAKitTGF-β1兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1規(guī)格：48T/96T

促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），人ACTH(1-39),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit  rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），大鼠ACTH (1-39), rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  英文名稱HumanCCL24ELISAKit人CCL24規(guī)格：96T/48T  人還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

促腎上腺皮質(zhì)激素（18-39），人ACTH (18-39), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR  非哺乳動物封阻緩沖液100毫升  小鼠程序性死亡1(PD-1)試劑盒 Mouse Programmed Death 1,PD-1 ELISA Kit

去乙?；L春瑞濱質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Deacetyl Vinorelbine  HumanflagellinELISA試劑盒人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF15 ELISA Kit

酸長春瑞濱水合鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Vinorelbine ditartrate salt hydrate  組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測試劑盒20  人靶向核糖核酸酶()ELISA檢測試劑盒Humaargetedribonuclease,ELISAKit 96T/48T

N-代丁二(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Iodosuccinimide  Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  鮭魚促胰液素/胰泌素(SCT)試劑盒 Salmon Secretin,SCT ELISA kit

N',N-二甲基甘氨酸鹽酸鹽(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRN-N-Dimethylglycine   兔抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  CLIAKitforPLGFELISAKit大鼠胎盤生長因子規(guī)格：48T/96T