參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：坎氏弧菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1236
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼扎替丁質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP31Nizatidine

CL-0444SNU-5(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2羧甲基纖維素質(zhì)量規(guī)格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.sCarboxymethyl cellulose

LCK Others Human  Lck Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟達(dá)拉賓質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BRFludarabine

支氣管平滑肌細(xì)胞RNAHBSMC miRNA5 μg氨魯米特（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aminoglutethimide

WISH細(xì)胞，羊膜細(xì)胞 肺癌細(xì)胞,A-427細(xì)胞 rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞氟他胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP29Flutamide

坎氏弧菌PCR檢測試劑盒布立尼布Brivanib質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  英文名稱RatVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子(VWF)規(guī)格：96T/48T  人白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫(>98.0%(GC))4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)  果菜L-天門冬酰胺化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20  兔子髓過氧化物酶(MPO)試劑盒 Rabbit Myeloperoxidase,MPO ELISA kit

4,4'-雙(甲氨基)二苯甲酮(>98.0%(T))4,4'-Bis(methylamino)benzophenone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)  ELISAKity-Ⅱ人胰蛋白酶原Ⅱ規(guī)格：48T/96T  視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 ，英文名： RBP ELISA Kit

2,4'-二氯二苯甲酮(>99.0%(GC))2,4'-Dichlorobenzophenone質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)  小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒 ，英文名： SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit  PorcineCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸氫小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品）BERBERINE  SULFATE質(zhì)量規(guī)格：含量測定  大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA檢測試劑盒RatNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 96T/48T  ELISAKitANGA兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w規(guī)格：48T/96T

度米芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Domiphen bromide質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定  人多巴胺D1受體(D1R)試劑盒 Human D1R ELISA Kit  ChickenIerleukin6,IL-6ELISAKit雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

醋酸優(yōu)力司特；醋酸烏利司他Ulipristal acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit大鼠色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

杯莧甾酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Cyasterone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品  DNA定向連接克隆完全試劑盒(包括雙內(nèi)切酶)10  小鼠白介素18(IL-18)試劑盒 Mouse Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit