參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：哈維氏弧菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1240
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利格列汀;利拉利汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制劑Linagliptin

CL-0329Chang liver (CCL13) (張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-谷氨酸-α-芐酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Glutamic  1-Benzyl Ester

CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%H-Leu-OEt·HCl

小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLL-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Phenylalanine

Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBSL-天冬酰胺;L-天冬酰一水  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一水L-Asparagine Monohydrate

哈維氏弧菌PCR檢測試劑盒補骨脂二氫黃酮;補骨脂甲素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Bavachin  Humanglucoprotein130,gp130ELISA試劑盒人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 ，英文名： NP-Y ELISA Kit

補骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Bakuchiol  組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SI1)活性熒光定量檢測試劑盒20  人胸苷酸合成酶(TS)ELISA檢測試劑盒Humahymidylatesyhetase,TSELISAKit 96T/48T

D-(-)-奎寧酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品D-(?)-Quinic   humanMusmusculussimilao60SribosomalproteinL12,LOC382344ELISAKit人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  鵝骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)試劑盒 Goose Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit

辣椒堿,辣椒素（天然提取標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：辣椒堿含量HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Capsaicin  兔固酮(ALD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  CLIAKitforPlaVitaminB6,VB6ELISAKit植物維生素B6規(guī)格：48T/96T

硫酸羥基氯喹Hydroxychloroquine Sulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%  ELISAKitHBVpreS2Ag人乙型肝炎病毒前S2抗原規(guī)格：48T/96T  肽酰脯酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒 ，英文名： PPIL1 ELISA Kit

乙酰唑胺Acetazolamide質(zhì)量規(guī)格：>99%  小鼠精酸/絲酸豐富剪接因子4(SRSF4)ELISA試劑盒 ，英文名： SRSF4 ELISA Kit  MouseThyroxineaibody,TAbELISA試劑盒小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Br-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)  人α甘露糖苷酶(αManase)ELISA檢測試劑盒Humanαmannosidase,αManaseELISAKit 96T/48T  Dolichosbifowsagglinin,DBAELISA試劑盒雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-酮(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)  大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA kit  Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T