服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號 |
皮欽德病毒PCR檢測試劑盒 | 50T | EY00P897 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實驗外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
CM-H036小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL氫氯噻嗪質(zhì)量規(guī)格:度>99%,ARHydrochlorothiazide
HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氫氯噻嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Hydrochlorothiazide
小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醋酸高(>95%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BCLead (IV) acetate
ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP](穩(wěn)定株)小鼠軟骨細(xì)胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP] (stable sain) mice cartilage cells DMEM/F12(1:1)+10% FBS粉(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCLead powder
IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / ierleukin 7 蛋白堿式碳酸(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRLead(II) carbonate basic
奧卡西平(標(biāo)準(zhǔn)品)Oxcarbazepine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 ELISAKitT兔子睪同規(guī)格:48T/96T
金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Hypericin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISAKit雞核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-葡萄糖-6-1酸D-(+)-Glucopyranose 6-phosphate質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進(jìn)口原裝 HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISA試劑盒人抗1脂酰絲氨酸抗體(APSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-1酸葡萄糖三鈉鹽D-Gluconate 6-phosphate 3 salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 植物細(xì)胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20 小鼠阿立新A(Orexin A)試劑盒 Mouse Orexin A ELISA Kit
皮欽德病毒PCR檢測試劑盒拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Lamivudine質(zhì)量規(guī)格:含量測定 [35S]-Met細(xì)胞代謝標(biāo)記試劑盒20 豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T
酸性品紅 Fuchsin質(zhì)量規(guī)格:BS MouseAquaporin3,AQP-3ELISA試劑盒小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanplateletbasicprotein,PBPELISA試劑盒人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
茜素絡(luò)合指示劑(IND)Alizarin complexone質(zhì)量規(guī)格:IND 小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ELISAKitVB12植物維生素B12規(guī)格:48T/96T
茜素絡(luò)合指示劑(高級,98%)Alizarin complexone質(zhì)量規(guī)格:高級,98% Rat protein kinase B (PKB) ELISA Kit 大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒 HumanCyclin-dependekinase1,CDK-1ELISAKit人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
關(guān)鍵字: 皮欽德病毒核酸檢測試劑盒;皮欽德病毒PCR試劑盒;皮欽德病毒PCR擴增試劑盒;皮欽德病毒PCR熒光探針試劑盒;皮欽德病毒通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
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