1.售前須知:
該細胞較難消化,注意延長消化時間,消化到細胞收縮變圓,輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊,細胞可
以滑落方可終止消化;通常需要10~15分鐘。
2.細胞起源:
細胞簡稱 MCF 10A
細胞別稱 MCF 10A; MCF.10A; MCF10A; MCF10a; MCF-10 Attached; Michigan Cancer Foundation-10A
供體年齡 36歲
組織來源 乳腺;乳房
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞類型 自發(fā)永生化細胞
生長特性 貼壁細胞
生物安全等級 1
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)+5% HS(164215)+20ng/ml EGF+0.5μg/ml Hydrocortisone+10μg/ml Insulin+1% NEAA(PB180424)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液;
6、收集細胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 10~15分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準,網(wǎng)站說明書僅供參考。