1.售前須知:
1、未分化、低分化和高分化的區(qū)別:未分化的PC-12從形態(tài)上看是圓形的,聚團(tuán)生長(zhǎng)的漂浮細(xì)胞;低分化的成多角形,有較短的突起;高分化的細(xì)胞有多個(gè)突起,突起數(shù)目不等,突觸較長(zhǎng),類似神經(jīng)元軸突。 2、低分化和高分化是在未分化的PC-12基礎(chǔ)上誘導(dǎo)產(chǎn)生的,低分化和高分化指的與神經(jīng)細(xì)胞表型的相似程度,高分化更接近神經(jīng)細(xì)胞表型。
2.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 PC-12(低分化)
細(xì)胞背景描述 PC-12(低分化)細(xì)胞是來(lái)自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。PC-12(低分化)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體,NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。PC-12(低分化)細(xì)胞不合成腎上腺素。
供體年齡 雄
組織來(lái)源 腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤
細(xì)胞形態(tài) 多角形
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 腎癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟 1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 1~2分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說(shuō)明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說(shuō)明書僅供參考。