1.售前須知:
1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性; 2、該細(xì)胞不建議更換為DMEM培養(yǎng),圓形較多,效果不好。
2.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 SW480 [SW-480]
細(xì)胞別稱 SW-480; SW 480; SW480E
細(xì)胞背景描述 SW480 [SW-480]細(xì)胞源自原位直腸腺癌,和SW620細(xì)胞源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。CSAp和直腸抗體3陰性;角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代,309位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代。細(xì)胞p53蛋白表達(dá)水平提高,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽性,癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測(cè)。SW480 [SW-480]細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞溶解酶,一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。有報(bào)道稱,SW480 [SW-480]細(xì)胞表達(dá)GM-CSF。SW480 [SW-480]細(xì)胞ras原癌基因的12位密碼子有一個(gè)突變,可以用作PCR法檢測(cè)該突變的陽性對(duì)照。1978年11月,A·Leibovitz將其提交給ATCC時(shí)已傳代至第91代。
供體年齡 男性,50歲
組織來源 直腸;結(jié)直腸腺癌
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 腸癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15(PM151010)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,100%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~30-50小時(shí)
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。