β-N-甲氨基-L-丙氨酸(BMAA)檢測(cè)試劑盒
BMAA ELISA Test Kit
PN 520040
(請(qǐng)以英文為準(zhǔn),中文僅供參考)
概述
這個(gè)Abraxisβ-N-甲基氨基-L-丙氨酸(BMAA)ELISA檢測(cè)試劑盒適用于定量檢測(cè)水樣中β-N-甲基氨基-L-丙氨酸(BMAA)的含量。本試劑不適用于臨床診斷。
安全性說(shuō)明
試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)溶液含有少量的BMAA。另外,底物溶液含有四甲基聯(lián)苯胺,終止溶液含有稀硫酸。要避免皮膚和底物溶液、終止液接觸。如果不小心接觸的話請(qǐng)用清水沖洗。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
這個(gè)Abraxis β-N-甲基氨基-L-丙氨酸 ELISA 檢測(cè)試劑盒應(yīng)該置于4–8°C保存。在使用前要提前拿出來(lái)回復(fù)到室溫(20-25°C)。在有效期內(nèi)都可以使用。
原理
這個(gè)Abraxisβ-N-甲基氨基-L-丙氨酸 ELISA 檢測(cè)試劑盒是基于通過(guò)特異性抗體識(shí)別BMAA的直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫反應(yīng)。當(dāng)樣品中含有β-N-甲基氨基-L-丙氨酸時(shí),并且BMAA-HRP類似物競(jìng)爭(zhēng)兔抗BMAA的結(jié)合位點(diǎn)抗體在溶液中, 然后將BMAA抗體與第二抗體(山羊抗兔)固定在微量滴定板的孔上。 在洗滌步驟和加入底物溶液后,產(chǎn)生了一個(gè)顏色反應(yīng)。 加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色;在450nm波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè),樣品中的β-N-甲基氨基-L-丙氨酸濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
試劑盒的局限性和可能的交叉反應(yīng)
對(duì)在水樣中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物已近作過(guò)檢測(cè)對(duì)此試劑盒并無(wú)干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能完全避免的。發(fā)現(xiàn)以下物質(zhì)的存在對(duì)BMAA試劑盒沒(méi)有顯著影響:硫酸錳和氧化鋁高達(dá)10,000ppm;氯化鈣和硫代硫酸鈉可達(dá)1000PPM;磷酸鉀,硫酸亞鐵和硫酸鋅至100ppm;氯化銅,硫酸鈣,硫酸鎂,氟化鈉和硝酸鈉至多10ppm;氯化鈉最高至1 ppm;胡敏酸和氯化鎂高達(dá)0.1 ppm;甲醇達(dá)1%;和海水高達(dá)10%。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤,比如:試劑盒保存條件不對(duì)、錯(cuò)誤的加液順序、試劑的量沒(méi)有加準(zhǔn)確、孵育的時(shí)間太長(zhǎng)或太短、孵育的溫度太高或太低。操作過(guò)程不易在強(qiáng)光下進(jìn)行。和其它檢測(cè)方法一樣對(duì)陽(yáng)性結(jié)果要求通過(guò)其它傳統(tǒng)的方法來(lái)驗(yàn)證。
測(cè)定的重要性
β-N-甲基氨基-L-丙氨酸(BMAA)是由幾種類型的藍(lán)細(xì)菌產(chǎn)生的非蛋白質(zhì)氨基酸。當(dāng)攝入時(shí),BMAA會(huì)破壞并最終破壞運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元導(dǎo)致ALS患者出現(xiàn)相同類型的損傷,并引起脊髓神經(jīng)原纖維纏結(jié)臍帶和腦,類似于阿爾茨海默病中所見(jiàn)。那些遭受這種BMAA引起損害的人是歸類為患有肌萎縮側(cè)索硬化/帕金森綜合征癡呆綜合征(ALS / PDC)。癥狀ALS / PDC包括ALS的肌肉麻痹程度,帕金森病的肌肉僵硬程度和阿爾茨海默病癡呆并最終導(dǎo)致死亡。通過(guò)攝入受污染的飲用水或食物,人類可能會(huì)接觸BMAA。飲用水可能通過(guò)在飲用水源中產(chǎn)生BMAA的藍(lán)細(xì)菌的增殖而被BMAA污染,如湖泊和水庫(kù)。目前還不清楚水處理的各種方法是否能夠去除BMAA來(lái)自飲用水供應(yīng)。暴露也會(huì)徹底攝入諸如蘇鐵種子等植物的食物,
已知BMAA的藍(lán)細(xì)菌生活并因此污染植物及其種子,并通過(guò)植物攝入食用含有植物或藍(lán)藻的毒素的魚(yú)類或其他動(dòng)物。這是一個(gè)例子,20世紀(jì)50年代關(guān)島出現(xiàn)了生物放大,當(dāng)時(shí)食用蘇鐵種子的果蝠被原籍查莫羅人食用引起ALS / PDC病例急劇增加,在關(guān)島被稱為“裂解物”。BMAA ELISA允許重復(fù)測(cè)定42個(gè)樣品的分析。少于1毫升的樣本是必需的。測(cè)試可以在大約2小時(shí)內(nèi)完成。
性能數(shù)據(jù)
靈敏度:BMAA(95%B / B 0)的定量限為約4 ng / mL。 中間的測(cè)試(50%B / B 0)約為100ng / mL。 確定更接近中間的校準(zhǔn)曲線給出最準(zhǔn)確的結(jié)果。樣品濃度可以針對(duì)需要下限的樣品進(jìn)行檢測(cè)(可根據(jù)要求從Abraxis獲得技術(shù)公告)。
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